結(jié)直腸癌外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)的臨床診療價(jià)值研究.pdf

1、目的：應(yīng)用密度梯度離心法聯(lián)合流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)外周血中結(jié)直腸癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞，分析其與浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤分化程度等關(guān)系，探討運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)直腸癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cell，CTC）的臨床價(jià)值。
　　方法：⑴采集2014年5月1日至2015年1月31日莆田學(xué)院附屬醫(yī)院胃腸外科60例結(jié)直腸癌患者外周血10ml，采集2014年6月1日至2014年11月31日共15例健康志愿

2、者外周血10ml作為對(duì)照組。⑵外周血淋巴細(xì)胞分離法制備外周血單個(gè)核細(xì)胞懸液，平分為試驗(yàn)管和對(duì)照管，試驗(yàn)管分別標(biāo)記CK19、EP-CAM、CD45單克隆抗體。陰性對(duì)照管分別加入同型對(duì)照抗體。⑶標(biāo)記好的外周血單個(gè)核細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀，檢測(cè)CK19+/EP-CAM+/CD45-的細(xì)胞，作為結(jié)直腸癌患者CTC的標(biāo)志。⑷所得結(jié)果用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用χ2檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：①6

3、0例結(jié)直腸癌患者中26例檢測(cè)出CTC，CTC的陽(yáng)性率為43.33％，15例健康志愿者中未檢測(cè)出 CTC，兩組陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。②60例結(jié)直腸癌患者根據(jù)臨床TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)不同，CTC陽(yáng)性率分別為10.00%、35.71%、52.94%和100.00%，四組陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；根據(jù)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況(N0、N1、N2期)不同，CTC陽(yáng)性率分別為25.00%、50.00%、75.00%，

4、三組陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；根據(jù)臨床腫瘤浸潤(rùn)深度（T1、T2、T3、T4期）不同，患者 CTC陽(yáng)性率分別為12.50%、26.67%、45.83%、76.92%，四組陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。根據(jù)腫瘤分化程度（高分化、中分化、低分化）不同，患者CTC陽(yáng)性率分別為22.22%、41.67%、66.67%，三組陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）
　　結(jié)論：⑴運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)，可以檢測(cè)到結(jié)直腸癌患者