人纖溶酶原Kringle 5基因的結構改造及其在大腸桿菌中的表達、純化與鑒定.pdf

1、學校代碼：10610學號：S042945四川大學碩士學位論文題目：厶紅溶酶廈煎!i凸g!曼墨基因的結掏塑造盈甚查太腸拄董蟲的麥達!純絲皇鑒定二oo七年五月四川大學碩士學位論文中文摘要人纖溶酶原Kringle5基因的結構改造及其在大腸桿菌中的表達、純化與鑒定研究生查曉軍導師翟朝陽教授背景與目的病理性血管生成是腫瘤生長和轉移的關鍵環(huán)節(jié)之一，因而阻斷或抑制新生血管的生成是抗腫瘤治療的有效策略。同時病理性血管生成也見于糖尿病視網(wǎng)膜病變、動脈粥樣

2、硬化、慢性風濕性關節(jié)炎等多種疾病。近年來人們對血管的生成機制進行了廣泛深入地研究，已證明血管的生成受多種相關因子的調節(jié)，相繼發(fā)現(xiàn)了多種血管生成因子和血管生成抑制因子。以血管生成為靶點治療腫瘤已成為腫瘤治療研究的熱點，有多種血管生成抑制劑相繼進入臨床試驗階段。人纖溶酶原Kringle5(簡稱KS)是新近發(fā)現(xiàn)的一種血管生成抑制因子，它是人纖溶酶原中的第五個餅環(huán)區(qū)(即Kringle環(huán))，約有80多個氨基酸殘基，分子量約為14kDa，其中Kri

3、ngle環(huán)含有嚴格保守的3個二硫鍵。它能作用于增生的血管內皮細胞，抑制細胞的增殖、遷移，并能誘導細胞凋亡，是最強的內源性血管增生抑制劑之一。但K5的具體作用機制目前還不明確。在研究K5作用機制的同時，通過改造它的結構以提高其活性成為另一研究熱點。近來，有學者通過基因工程方法除去了K5環(huán)兩邊的氨基酸臂，保留了三個完整的二硫鍵，獲得了一個突變的K5(即liteK5)。這種K5突變體在動物實驗中表現(xiàn)出更高的活性，其抑制血管內皮細胞增生的能力約