人蛔蟲體腔液對肺癌細胞株（A549）IL-6、TGF-β分泌的影響.pdf

1、南昌大學醫(yī)學院碩士學位論文人蛔蟲體腔液對肺癌細胞株（A549）IL6、TGFβ分泌的影響姓名：黃艷琴申請學位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學指導教師：袁鏗20060501入蛔蟲體腔液對肺癌細胞株(A549)IL_6、TGFB分泌的影響研究生黃艷琴導師纛鏗摘要囂鰉：用人蛔蟲體腔液(hscarisbodyfluid，ABF)干預體外培養(yǎng)的人肺腺瘸細胞株A549，探討ABF對A549細胞分泌L～6、TGF—B的影響，即ABF濃度和作糯時闖與I己一6

2、、TGF一分泌水平的關(guān)系，黻及ABF影響下靶緬胞乙一6、TGF—B分泌與細胞凋亡的關(guān)系。方法：i繪制A549纓脆生長曲線：取對數(shù)生長期的A549細胞常規(guī)消化計數(shù)，準確將細胞分別接種于24孔培養(yǎng)板中，每日取3孔計數(shù)，連續(xù)觀察7天。掌握靶纓您基本生長翅律。2ABF制備：對蛔蟲感染者～次日服雙羥萘酸噻嘧啶(30mg／Kg體重)，服藥后從糞便中收集蛔蟲成蟲。取完整的蛔蟲，經(jīng)自來水、涎菌生理鹽承洗凈看，濾紙吸予，挎鑷子夾往前端，使之垂直予瀵纛離心

3、管上，在蟲體末端剪4口，體液自然流出，逐條收集。收集的液體在i0，000g離心30分鐘，取上清，經(jīng)0。45ixm醋酸纖維膜過濾除藏，用核酸蛋囪儀溺蛋自含壁為337099／ml，置一304C儲藏備饜。3細胞毒性實驗：取對數(shù)生長期的A549細胞常規(guī)消化計數(shù)，準確將細胞分剮接嵇予96孔培養(yǎng)投中，將起始濃度藥3370弘g／ml的ABF倍比稀釋至135ixg／ml，用MTT法檢測細胞活性，取細胞存活率大予50％的ABF濃度為誘導實驗的濃度范圍。4