胎兒與成人主要器官miRNAs的表達(dá)量分析.pdf

1、micro RNA（miRN A)是生物體內(nèi)一類長(zhǎng)約21-25個(gè)核苷酸的非蛋白編碼的單鏈小分子RNA。它以堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式結(jié)合到靶mRNA的3’非翻譯區(qū)f3'UTR，通過(guò)剪切、降解靶mRNA或是抑制靶mRNA的翻譯，在基因轉(zhuǎn)錄后水平上微調(diào)基因的表達(dá)。大量的研究證明，miRNA在細(xì)胞的分化、增殖與凋亡，生物體的生長(zhǎng)發(fā)育，腫瘤的形成以及多種疾病的發(fā)生等多種過(guò)程中起著極其重要的基因表達(dá)調(diào)控作用。
　　 研究表明，miRNA的表達(dá)具有

2、組織特異性和表達(dá)時(shí)序性。我們通過(guò)檢測(cè)和分析我們收集到的一例成人與一例胎兒各七種組織（肝臟組織、肺組織、大腸組織、脾臟組織、腎臟組織、大腦組織、心臟組織）中，miRNA在二者各相應(yīng)組織中表達(dá)含量的異同，來(lái)探究其在生物體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的變化趨勢(shì)并推測(cè)相關(guān)miRNA的生物學(xué)功能。
　　 我們將以上十四個(gè)組織分別依次采取：小分子RNA的提取，加多聚A尾，用苯酚一氯仿法抽提多聚A尾的小RNA，逆轉(zhuǎn)錄，在特定PCR體系下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄PCR以及

3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)方法來(lái)檢測(cè)miRNA的表達(dá)含量。
　　 經(jīng)過(guò)相關(guān)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，我們發(fā)現(xiàn)胎兒樣本各組織中總miRNAs的表達(dá)量比相對(duì)應(yīng)的成人樣本中總miRNAs的表達(dá)量高。與此同時(shí)，在胎兒及成人相對(duì)應(yīng)的組織中表達(dá)量排名前十的m缺NA的種類也不盡相同。而胎兒樣本跟成人樣本在相同組織中同種miRNA的表達(dá)量上也有很大的不同。
　　 通過(guò)對(duì)miRNAs靶基因的預(yù)測(cè)分析，我們發(fā)現(xiàn)miRNAs的表達(dá)是具有協(xié)同性的，很多miR