參紅祛瘀散結(jié)膠囊HPLC指紋圖譜及含量測定研究.pdf

1、目的：建立參紅祛瘀散結(jié)膠囊HPLC指紋圖譜，在相同色譜條件下，建立其水提、醇提中間體、君藥原藥材的HPLC指紋圖譜質(zhì)量控制方法；運(yùn)用所建立的指紋圖譜共有峰數(shù)據(jù)信息計算相似度，對成品、中間體和原藥材的質(zhì)量進(jìn)行評價；并對成品、中間體和原藥材的指紋圖譜進(jìn)行相關(guān)性分析。建立參紅祛瘀散結(jié)膠囊有效成分延胡索乙素和鹽酸小檗堿的HPLC含量測定方法，中藥制劑指紋圖譜作為質(zhì)量控制和鑒別的新技術(shù),為質(zhì)量評價問題的解決提供了新的思路和方法。
　　方法：

2、（1）采用高效液相色譜法,色譜柱:Agilent ZOBAX SB C18 ODS柱(4.6*150mm,5μm)加保護(hù)柱(Phenomenex Security Guard);流動相：B乙腈-D磷酸（0.1％，V/V），梯度洗脫;檢測波長:0～60min254nm,60～65min203nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量:10μl；分析時間:65 min；以保留時間與鹽酸小檗堿一致的色譜峰為參照峰，對10批參紅祛瘀散結(jié)膠囊成品進(jìn)行了HPLC指

3、紋圖譜測定；同時建立了10批水提中間體與醇提中間體，10批紅花、延胡索(醋制)和人參藥材干膏的HPLC指紋圖譜，并用國家藥典委員會開發(fā)的中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2004A版)進(jìn)行相似度計算，研究參紅祛瘀散結(jié)膠囊成品與中間體、組方藥材指紋圖譜色譜峰的相關(guān)性，并對成品中指紋圖譜色譜峰進(jìn)行歸屬。
　?。?）同時測定參紅祛瘀散結(jié)膠囊中有效成分延胡索乙素和鹽酸小檗堿的含量。色譜條件：色譜柱: Agilent ZOBAX SB C18

4、 ODS柱(4.6*150mm,5μm)加保護(hù)柱(Phenomenex Security Guard)；流動相：B乙腈-D磷酸（0.1%，V/V），梯度洗脫；柱溫:30℃；檢測波長:280nm；分析時間:25min;流速:1.0 ml·min-1。
　　結(jié)果:（1）建立的參紅祛瘀散結(jié)膠囊成品HPLC指紋圖譜，標(biāo)定了25個共有特征峰，10批成品的相似度為0.929～0.998;水提物中間體HPLC指紋圖譜標(biāo)定了17個共有特征峰，10

5、批干膏的相似度為0.903～0.983；醇提物中間體HPLC指紋圖譜標(biāo)定了15個共有特征峰，10批干膏的相似度為0.961～0.999。同時，還研究了參紅祛瘀散結(jié)膠囊成品、中間體以及原藥材的相關(guān)性，對參紅祛瘀散結(jié)膠囊成品HPLC指紋圖譜中的主要色譜峰的來源進(jìn)行了歸屬。建立的參紅祛瘀散結(jié)膠囊HPLC指紋圖譜共有模式應(yīng)用于15批不同質(zhì)量的成品分析，根據(jù)其相似度顯示不合格產(chǎn)品相似度低于0.9。表明參紅祛瘀散結(jié)膠囊HPLC指紋圖譜是一種可量化的

6、判斷真?zhèn)巍⒃u價優(yōu)劣的質(zhì)量控制方法。
　　（2）10批參紅祛瘀散結(jié)膠囊中有效成分延胡索乙素的含量測定結(jié)果為：15.58μg/?！?7.35μg/粒。10批參紅祛瘀散結(jié)膠囊中有效成分鹽酸小檗堿的含量測定結(jié)果為:17.44μg/粒～24.64μg/粒。
　　結(jié)論：參紅祛瘀散結(jié)膠囊成品、中間體和原藥材的指紋圖譜，可以在很大程度上表達(dá)其藥材、生產(chǎn)工藝、貯存過程中化學(xué)成分的變化，更有效的進(jìn)行制劑質(zhì)量跟蹤，是符合中藥制劑特色的質(zhì)量控制模式