早期梅毒的分子流行病學(xué)研究-我國多地區(qū)性病門診的橫斷面調(diào)查.pdf

1、梅毒是世界范圍內(nèi)常見的性傳播疾病之一，據(jù)WHO(WorldHealthOrganization，世界衛(wèi)生組織)最新估計全球每年新發(fā)梅毒患者1060萬例。梅毒對人類的危害和致病性一直備受關(guān)注，其病原體T.pallidum（Treponemapallidum，梅毒螺旋體）可侵犯皮膚黏膜、心血管、神經(jīng)、骨骼等造成多系統(tǒng)損害；梅毒能促進HIV的感染和傳播，加速艾滋病的病程；感染梅毒的妊娠期婦女可發(fā)生流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)，以及分娩低出生體重兒和先天梅

2、毒兒等。我國于1964年基本消滅了梅毒，但自從20世紀70年代末期實行對外開放政策和經(jīng)濟體制改革以來，由于大量農(nóng)村人口向城市流動，以及賣淫嫖娼等社會現(xiàn)象的出現(xiàn)，各種性病特別是梅毒又死灰復(fù)燃并迅速蔓延。據(jù)全國性病疫情監(jiān)測系統(tǒng)統(tǒng)計，我國梅毒發(fā)病率自2003年至今呈顯著增長趨勢，2011年的梅毒報告發(fā)病率高達32.04/10萬，比2010年增長10.89％，梅毒發(fā)病人數(shù)居全國乙類傳染病第三位。開展梅毒發(fā)病、流行和預(yù)防控制相關(guān)領(lǐng)域的研究已經(jīng)成為

3、我國性病防治研究的重要內(nèi)容。
　　 T.pallidum無法在體外成功培養(yǎng)為梅毒的研究帶來一定的困難。20世紀90年代，Nichols株基因組全部堿基對的成功破解使得從基因分子生物學(xué)的角度研究梅毒成為可能。分子流行病學(xué)是傳統(tǒng)流行病學(xué)與分子生物學(xué)交叉融合的產(chǎn)物，是研究傳染性疾病流行特征的有力工具。其應(yīng)用先進的技術(shù)測量人群中特異性分子生物學(xué)標(biāo)志的分布情況，并結(jié)合流行病學(xué)的現(xiàn)場研究方法探討疾病的流行特征?；蚍中拖到y(tǒng)是開展梅毒分子流行

4、病學(xué)研究的重要方法之一，能從微觀層面區(qū)分不同的菌株，從而有助于探討傳播的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系、追溯傳染源、區(qū)分復(fù)發(fā)和再感染，同時可以研究基因型別與臨床特征之間的聯(lián)系，還有助于更好的研究梅毒在不同的時間、空間和人群中的流行特點。1998年，美國CDC(CenterforDiseaseControlandPrevention，疾病預(yù)防控制中心)建立了基于arp和tprⅡ亞家族的雙基因分型系統(tǒng)。2010年，美國華盛頓大學(xué)的梅毒研究團隊又在此基礎(chǔ)上引入tp

5、0548基因，進一步提高了分型的區(qū)分度。
　　 梅毒分子流行病學(xué)的另一個重要方面是通過對基因突變的檢測監(jiān)測T.pallidum對大環(huán)內(nèi)酯類藥物（如阿奇霉素）耐藥的狀況。由于阿奇霉素具有單劑量口服治療梅毒且不會導(dǎo)致青霉素所致的過敏反應(yīng)，現(xiàn)場防治和性伴治療時方便快捷、依從性好等特點，同時在部分國家開展的隨機對照臨床試驗證實其療效和青霉素相當(dāng)，因此單劑量阿奇霉素在梅毒治療中的應(yīng)用受到廣泛關(guān)注。然而，近年來在美國等發(fā)達國家不斷有臨床使用

6、阿奇霉素治療梅毒失?。退帲┑膱蟮溃⑶疫@種耐藥性正在一定的性網(wǎng)絡(luò)中傳播，有逐年上升的趨勢。已有分子生物學(xué)研究證實耐阿奇霉素菌株的23SrRNA基因第2058位點的堿基發(fā)生A至G的點突變。在特定的時間、區(qū)域和人群中用該分子生物學(xué)標(biāo)志監(jiān)測耐藥菌株的流行情況，不僅可以了解阿奇霉素耐藥的狀況，而且有助于指導(dǎo)區(qū)域特異性的梅毒治療，特別是梅毒防控的現(xiàn)場治療。
　　 目前，我國湖南、廣州、江門和上海有關(guān)于雙基因定位分型的研究報道；同時上海有

7、關(guān)于阿奇霉素耐藥性突變監(jiān)測的報道，但均是小范圍研究且樣本量小。我國是世界上梅毒疫情嚴重的國家之一，尚未有多地區(qū)較大規(guī)模的梅毒分子流行病學(xué)研究，尚不了解T.pallidum基因型別的分布特點、阿奇霉素耐藥性突變的總體流行情況以及對防治實踐的影響。
　　 本研究分為三個部分。第一部分，世界范圍內(nèi)梅毒分子流行病學(xué)的系統(tǒng)綜述和meta分析：本部分在5個數(shù)據(jù)庫中全面檢索自1998年10月17日首次報道梅毒基因分型的研究以來截至2010年1

8、2月31日所有已發(fā)表的梅毒分子流行病學(xué)研究，共16篇，并給予系統(tǒng)評價。結(jié)果表明早期梅毒的皮損標(biāo)本，如硬下疳、扁平濕疣、濕丘疹或粘膜斑，最適合用于分子診斷和分子流行病學(xué)調(diào)查。耳垂刮出血有望成為研究無明顯皮損的梅毒病例的首選標(biāo)本類型，但尚需大樣本研究加以證實。世界范圍內(nèi)T.pallidum的基因型別存在高度的多樣性，其中14d、14f.14a、13d和15d最為流行?；蛐蛣e和阿奇霉素耐藥性突變以及神經(jīng)梅毒之間聯(lián)系的相關(guān)資料比較有限。第二部

9、分，梅毒的分子診斷、基因分型和阿奇霉素耐藥性突變檢測的實驗室方法學(xué)建立：本部分在第一部分系統(tǒng)比較國外各個研究的實驗室方法的基礎(chǔ)上，結(jié)合中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所性病控制中心STD（Sexuallytransmitteddiseases，性傳播疾?。﹨⒈葘嶒炇业目蒲袟l件，建立基于polA基因的梅毒分子診斷的實驗室方法。并在此基礎(chǔ)上，建立基于arp、tprⅡ和tp0548基因的分型系統(tǒng)，以及基于23SrRNA基因的阿奇霉素耐藥性突變的檢測方

10、法。第三部分，我國多地區(qū)STD門診早期梅毒分子流行病學(xué)的初步研究：本部分將第二部分建立的實驗室方法初步用于我國梅毒分子流行病學(xué)研究。在2008至2011年間，我們在我國東部、南部和北部三大地區(qū)的8個STD門診共招募391例早期梅毒患者，在知情同意的前提下每人完成一份結(jié)構(gòu)式問卷調(diào)查表，并采集一份皮損標(biāo)本。其中211例標(biāo)本能進行三基因完全分型和阿奇霉素耐藥性突變的檢測。總計發(fā)現(xiàn)27種基因型別，其中14d/f占39.8%，具有絕對的流行優(yōu)勢。