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1、目的:通過頭穴透刺對(duì)腦出血大鼠模型治療的實(shí)驗(yàn)研究,探討針刺對(duì)腦水腫調(diào)控因素影響的機(jī)制。 方法:本實(shí)驗(yàn)用健康雄性(wistar)大鼠144只,體重250-300克,隨機(jī)數(shù)字表分為A、B、C三組,每組又各分為12h、24h、3d、7d四個(gè)小組。每小組每時(shí)間點(diǎn)各12只動(dòng)物。動(dòng)物經(jīng)10%水合氯醛腹腔麻醉(400mg/kg體重),頭頂備皮后將動(dòng)物固定于三維立體定位儀上,局部皮膚處理后以前囪為坐標(biāo)原點(diǎn),向大鼠尾側(cè)0.2mm,大鼠右側(cè)2.9m
2、m,確定注射點(diǎn)坐標(biāo),用牙科鉆鉆孔(直徑1.0mm)(右尾狀核位置),A組:對(duì)照組 (48只)注入2u10.9%的生理鹽水,B組和C組:模型組(48只)和針刺組(48只)均用微量注射器吸取含0.5u/ul膠原酶的生理鹽水和7u/ul肝素的生理鹽水各1.0ul注入,每組于注射完畢、退針后,縫合頭皮,并于12小時(shí)、24小時(shí)、3d、7d參照Longa FZ五級(jí)評(píng)分法進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分,評(píng)分完畢后,按要求處置,測(cè)定腦含水量,進(jìn)行大鼠病理形態(tài)學(xué)觀察
3、,組織形態(tài)超微結(jié)構(gòu)觀察及免疫組化方法觀察AQP-4,MMP-2和MMP-9的表達(dá)。 結(jié)果: 1、腦出血后大鼠出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損,72h達(dá)高峰,之后有所下降。針刺組與模型組比較差異顯著(P<0.05)。針刺可以降低神經(jīng)功能缺損程度。 2、腦出血大鼠模型24h后腦含水量明顯增高,3d達(dá)高峰,針刺治療有較明顯的抗水腫作用,各時(shí)間點(diǎn)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3、腦出血周邊組織EB含量在24h達(dá)到高峰,24
4、h-72h間維持較高水平,顯著高于對(duì)照組;針刺組EB含量各時(shí)點(diǎn)均顯著低于模型組(P<0.05),EB含量與腦組織含水量呈正相關(guān)。 4、HE染色顯示:腦出血后24h血腫周圍可見白細(xì)胞浸潤(rùn),細(xì)胞間隙和血管周圍間隙增寬,3d上述病變加重,并見大量神經(jīng)細(xì)胞變性壞死,7d仍有增生的膠質(zhì)細(xì)胞,從病變的程度和范圍看,針刺組的病理改變要輕于模型組。 5、電鏡觀察BBB超微結(jié)構(gòu),出血后各時(shí)點(diǎn)BBB結(jié)構(gòu)均有破壞,72h最為嚴(yán)重;針刺治療后B
5、BB的開放相應(yīng)減小。 6、對(duì)照組有極少量AQP-4陽性細(xì)胞表達(dá);模型組中3d達(dá)高峰,各時(shí)點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組;針刺組表達(dá)減少(P<0.01)。AQP-4表達(dá)與腦組織EB含量呈正相關(guān)。 7、MMP-2在對(duì)照組極少量表達(dá);模型組中24h達(dá)高峰,各時(shí)點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組;針刺組表達(dá)減少(P<0.01)。 8、對(duì)照組有少量MMP-9陽性細(xì)胞表達(dá);模型組3d達(dá)高峰,各時(shí)點(diǎn)均顯著高于對(duì)照組;針刺組表達(dá)減少(p<0.01)。
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