纈沙坦對糖尿病大鼠腎臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激及炎癥反應的抑制作用.pdf

1、目的：
　　糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病的常見并發(fā)癥，同時也是糖尿病患者死亡的一個主要原因，其發(fā)病率一直呈逐年升高趨勢，目前已成為我國導致終末期腎病的第二大因素。近年的研究認為，DN是一種慢性炎癥性疾病，但其炎癥反應發(fā)生的原因尚未明確。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激（endoplasmic reticulum stress,ERS）已被證實與炎癥反應密切相關，可能在DN的炎癥反應中起到一定作用。本研究擬通過構(gòu)建

2、糖尿病大鼠模型，探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激及相關炎癥反應在糖尿病大鼠腎臟損害中的作用及血管緊張素受體拮抗劑纈沙坦對DN大鼠腎臟中ERS及相關炎癥的影響。
　　方法：
　　34只SD雄性大鼠，隨機分為對照組（Con組，n=10只）、模型組（DM組，n=12只）、纈沙坦治療組（DM+V組，n=12只）。DM組、DM+V組大鼠腹腔注射STZ40mg/kg，制作糖尿病模型，各組大鼠給予普通飼料喂養(yǎng)，DM+V組每天用纈沙坦灌胃6周（10 mg/k

3、g），Con組及DM組只灌等量蒸餾水。實驗結(jié)束后測量大鼠體重、雙側(cè)腎臟重量，應用免疫組化法檢測ERS標志蛋白GRP78及中性粒細胞趨化因子1（MCP-1）的蛋白表達及定位，Western blot方法檢測ERS相關蛋白P-IRE1α、JNK、P-JNK、NF-κB p65、P-NF-κB p65的蛋白表達水平，實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測腎組織中JNK、NF-κB及炎癥因子MCP-1、TNFα、IL-1βmRNA表達變化，同

4、時觀察各組大鼠24小時尿蛋白定量、血漿白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）等指標的變化。
　　結(jié)果：
　　1、與Con組相比，DM組大鼠24小時尿蛋白定量、BUN、Scr水平明顯升高（P<0.05），ALB明顯降低（P<0.05），與DM組相比，DM+V組24小時尿蛋白定量、BUN明顯降低（P<0.05），ALB明顯升高（P<0.05），Scr較DM組降低但無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；
　　2、HE染

5、色光鏡下Con組腎組織未見明顯病理改變，DM組大鼠腎小球系膜細胞增殖肥大，系膜區(qū)增寬，系膜基質(zhì)聚積,腎小球基底膜增厚，腎小管上皮細胞廣泛空泡變性，并可見炎細胞浸潤，DM+V組與DM組相比，系膜細胞增殖肥大、系膜基質(zhì)聚積、腎小管上皮細胞廣泛空泡變性均減輕；
　　3、免疫組化顯示Con組GRP78輕度表達、MCP-1幾乎無表達，與Con組相比，DM組GRP78、MCP-1表達明顯升高（P<0.05），且腎小管上皮細胞呈強陽性表達，與D

6、M組相比，DM+V組GRP78、MCP-1表達明顯降低（P<0.05）；
　　4、與Con組相比，DM組P-IRE1α、P-JNK、P-NF-κB p65蛋白表達水平明顯升高（P<0.05），與DM組相比，DM+V組P-IRE1α、P-JNK、P-NF-κB p65蛋白表達水平明顯降低（P<0.05），且P-JNK、P-NF-κB p65與P-IRE1α蛋白表達程度呈正相關（P<0.05）；
　　5、與Con組相比，DM組M

7、CP-1、IL-1β、NF-κB p65、TNFα mRNA表達明顯升高（P<0.05），與DM組相比，DM+V組MCP-1、IL-1β、NF-κB p65、TNFαmRNA表達明顯降低（P<0.05），3組間JNKmRNA表達變化無明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、DN中存在ERS的激活，活化的膜蛋白P-IRE1α可能通過激活JNK及NF-κB炎癥信號通路引起炎癥反應；
　　2、ANGII受體拮抗劑纈沙