血漿部分氨基酸濃度與線粒體基因突變及糖尿病關(guān)系的探討.pdf

1、目的：有研究顯示，胰島β細(xì)胞內(nèi)線粒體中谷氨酸在胰島素胞吐過程中可能起著信使作用，從而影響胰島素分泌。線粒體結(jié)構(gòu)和功能的異常會(huì)抑制葡萄糖刺激胰島細(xì)胞產(chǎn)生谷氨酸，最終影響胰島素分泌，進(jìn)而導(dǎo)致線粒體糖尿病的發(fā)生。由此可見，線粒體結(jié)構(gòu)的異?？赡苁怯绊懓被岽x的因素之一，因此在本研究中旨在探討線粒體基因突變、線粒體糖尿病與氨基酸代謝的相關(guān)情況，為臨床工作的研究提供依據(jù)。 方法：建立測(cè)定血漿氨基酸濃度的rHPLC法，檢測(cè)92例正常對(duì)照組、

2、168例糖尿病患者和35例有線粒體基因突變或線粒體糖尿病患者，對(duì)其血漿中的氨基酸進(jìn)行檢測(cè)分析，比較各組間氨基酸水平的差異性。 結(jié)果：1.利用rHPLC法檢測(cè)血漿中對(duì)胰島素分泌有影響作用或與谷氨酸代謝相關(guān)聯(lián)的氨基酸，所有樣品均有較好的分離效果，以鄰苯二甲醛為衍生劑、檸檬酸鹽、乙酸鹽緩沖液作流動(dòng)相的方法檢測(cè)氨基酸，以谷氨酸為例，其最低檢測(cè)線為1μm，保留時(shí)間變異系數(shù)平均值及峰面積的變異系數(shù)平均值分別為1.1880±0.5086和2.

3、0640±1.2560，回收率在95.34％～105.62％之間。 2.在糖尿病患者中，除天冬氨酸、谷氨酸外，谷氨酰胺、組氨酸、精氨酸、酪氨酸及亮氨酸等氨基酸含量均與糖化血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)(r=-0.245，p=0.01；r=-0.259，p=0.010;r=-0.198，p=0.048;r=-0.213，p=0.033；r=-0.215，p=0.032)，隨著糖化血紅蛋白的增加而下降，而這些氨基酸與糖化血紅蛋白之外的其他變量如病

4、程、空腹血糖和基礎(chǔ)胰島素之間無(wú)相關(guān)關(guān)系。 3.對(duì)于健康對(duì)照組，七種氨基酸中只有組氨酸含量與空腹胰島素水平成正相關(guān)(r=0.286，p=0.021)，隨著組氨酸含量的增加，空腹胰島素水平增加，而其余的氨基酸與其他變量之間無(wú)相關(guān)關(guān)系。 4.在線粒體基因突變或線粒體糖尿病組中，只是線粒體糖尿病患者的氨基酸水平與單純糖尿病患者表現(xiàn)相似；谷氨酰胺、組氨酸、精氨酸、酪氨酸及亮氨酸等氨基酸含量與糖化血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)(r=-0.253，

5、p=0.010；r=-0.273，p=0.027;r=-0.168，p=0.043；r=-0.223，p=0.030；r=-0.234，p=0.035)，隨著糖化血紅蛋白的升高而降低。與其它變量之間無(wú)相關(guān)關(guān)系。僅有線粒體基因突變的個(gè)體，其氨基酸水平與所有變量無(wú)相關(guān)關(guān)系。 5.在不同組別血漿中七種氨基酸比較：健康對(duì)照組7種氨基酸水平與糖尿病組、線粒體糖尿病組和線粒體基因突變組的氨基酸水平相比，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，

6、血漿氨基酸水平最高，而血漿氨基酸水平最低的一組為線粒體基因突變組，特別是tRNALeu(UUR)3243位點(diǎn)發(fā)生突變的個(gè)體，不僅與健康對(duì)照組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05)，而且與糖尿病患者相比也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。在不同位點(diǎn)突變的個(gè)體之間部分氨基酸也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 6.在所測(cè)的幾種氨基酸之間，無(wú)論是健康人還是糖尿病患者、線粒體基因突變個(gè)體或線粒體糖尿病患者，七種血漿氨基酸之間呈正相關(guān)(p＜0.01)也就是說線粒體基因

7、突變及糖尿病都不會(huì)影響氨基酸之間的關(guān)系，突變只是導(dǎo)致血漿氨基酸量變的因素之一。 結(jié)論：所建立的rHPLC法精確高度，重復(fù)性好，適用于血漿中氨基酸水平的測(cè)定。應(yīng)用該方法可以對(duì)處于不同生理狀態(tài)的人群進(jìn)行血漿氨基酸分析及時(shí)了解其代謝狀態(tài)。除了文獻(xiàn)所述氨基酸代謝受飲食結(jié)構(gòu)、社會(huì)背景、年齡等因素的影響外。許多疾病對(duì)其的影響也不容忽視，如糖尿病和線粒體基因突變。因此及時(shí)了解不同疾病對(duì)氨基酸代謝的影響有助于及時(shí)糾正代謝紊亂對(duì)疾病所造成的負(fù)面影