三種單基因突變糖尿病的基因篩查和臨床特點(diǎn)研究.pdf

1、本文分兩部分研究了三種單基因突變糖尿病的基因篩查和臨床特點(diǎn)。 第一部分：中國人Rabson-Mendenhall 綜合征一例胰島素受體基因突變的篩查。 研究目的： 胰島素受體基因突變引起的功能缺陷往往會導(dǎo)致嚴(yán)重的胰島素抵抗，出現(xiàn)一系列特征的臨床癥候群，稱之為遺傳性胰島素抵抗綜合征，包括有A 型胰島素抵抗綜合征、Rabson-Mendenhall 綜合征及矮妖精貌綜合征（Leprechaunism 綜合征）。

2、 本研究通過對一例臨床擬診Rabson-Mendenhall 綜合征的先證者及其一級親屬的胰島素受體基因進(jìn)行篩查，尋找該家系可能存在的胰島素受體基因突變，從而進(jìn)一步探討受體水平的胰島素抵抗機(jī)制及Rabson-Mendenhall 綜合征的病理生理特點(diǎn)。 研究對象和方法： 上海市第六人民醫(yī)院內(nèi)分泌科于2005 年收治的一名11 歲女性患者,臨床擬診為“Rabson-Mendenhall 綜合征”。該患者身高1.25m,體

3、重23Kg，體重指數(shù)14.72kg/m2，隨機(jī)血糖22.9mmol/L，HbA1c12.5％，對胰島素及口服降糖藥治療均不敏感。臨床表現(xiàn)為發(fā)育遲緩，形體略瘦，發(fā)際低，頭發(fā)濃密，乳恒牙換牙提前，牙質(zhì)增生，多毛，黑棘皮，陰蒂肥大。臨床輔檢提示高胰島素血癥及嚴(yán)重的胰島素抵抗。先證者父母非近親婚配且表型正常，否認(rèn)糖尿病或其它代謝疾病家族史。 抽取先證者及其父母的外周靜脈抗凝血, 按標(biāo)準(zhǔn)酚－氯仿法提取白細(xì)胞基因組DNA，采用PCR 直接測

4、序法對先證者及其父母胰島素受體基因的22 個(gè)外顯子進(jìn)行擴(kuò)增并直接測序，將測序結(jié)果與Pubmed 上公布的標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比較分析從而確定突變位點(diǎn)，并選擇93 例正常對照對相應(yīng)外顯子進(jìn)行篩查。 研究結(jié)果： 1）先證者及其母親胰島素受體基因2 號外顯子編碼83 位氨基酸的密碼子雜合突變即Arg → Gln (CGG-CAG)，該突變位于胰島素受體α亞基胰島素結(jié)合區(qū)，父親未攜帶此突變，此突變?yōu)閲H上首次發(fā)現(xiàn)的新突變； 2）

5、先證者胰島素受體基因17 號外顯子編碼1028 位氨基酸的密碼子雜合突變即Ala → Val (GCG-GTG)，該突變位于胰島素受體β亞基酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域，雙親均未攜帶該突變，為先證者自發(fā)突變； 3）本次研究共發(fā)現(xiàn)胰島素受體基因的12 個(gè)多態(tài)位點(diǎn)，其中內(nèi)含子11 的一個(gè)多態(tài)位點(diǎn)為新發(fā)位點(diǎn)，外顯子8，9，13，17 五個(gè)多態(tài)為同義突變，其余多態(tài)位點(diǎn)均位于非編碼區(qū)。 研究結(jié)論： 本課題發(fā)現(xiàn)了中國人第一例Rabson

6、-Mendenhall 綜合征患者，并在基因水平予以證實(shí)。其胰島素受體基因2 號外顯子R83Q 雜合突變以及17 號外顯子A1028V 雜合突變可能是導(dǎo)致該先證者高胰島素血癥及嚴(yán)重胰島素抵抗的主要原因。 第二部分：單基因突變糖尿病與2型糖尿病臨床特點(diǎn)的研究。 研究目的： 青少年發(fā)病的成年型糖尿病、線粒體基因突變引起的糖尿病以及胰島素受體基因突變引起的糖尿病是目前已經(jīng)證實(shí)的單基因突變糖尿病。前兩者容易與2型糖尿病相

7、混淆，本研究選擇上海市第六人民醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科，上海市糖尿病研究所以往篩查到的MODY3/5 以及線粒體基因突變糖尿病與早發(fā)2型糖尿病的臨床特點(diǎn)進(jìn)行比較，探討單基因突變糖尿病與2型糖尿病之間臨床特點(diǎn)的差異。 研究對象和方法： 1）選擇22例（女15 例/男7 例）攜帶線粒體tRNALeu(UUR)A3243G 基因突變的糖尿病患者以及13 例（女7 例/男6 例）攜帶HNF1 α或HNF1 β基因突變的MODY患者，分別

8、與151 例（女80 例/男71 例）2型糖尿病患者比較起病年齡、體脂參數(shù)、空腹血糖、胰島素、C 肽及穩(wěn)態(tài)模型評估法評估胰島素抵抗（HOMA-IR）和胰島β細(xì)胞功能（HOMA-B）。 2）比較11 例非糖尿病的線粒體基因突變攜帶者與82 例無此突變的正常糖耐量人群兩組間的糖脂代謝指標(biāo)。 研究結(jié)果： 1）線粒體基因突變糖尿病組體重指數(shù)、腰臀比、胰島素作用和分泌的簡易指標(biāo)（HOMA-IR、HOMA-B）及空腹胰島素水