乳腺腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)細(xì)胞因子的研究.pdf

1、腫瘤細(xì)胞和免疫系統(tǒng)之間存在著相互制約的關(guān)系，而全面闡述這兩者之間相互作用的分子機(jī)制是目前生命科學(xué)中較為前沿的方向之一。免疫系統(tǒng)通過(guò)一系列的機(jī)制試圖監(jiān)控及消除任何“突變”的細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞則有一系列保護(hù)機(jī)制來(lái)“抑制”或者“抵消”免疫系統(tǒng)的功能，形成腫瘤。全面深入了解這兩個(gè)系統(tǒng)之間的相互作用，分析參與這一過(guò)程的細(xì)胞因子結(jié)構(gòu)和功能，將會(huì)為腫瘤生物治療提供新的靶點(diǎn)。 乳腺癌早期就可有局部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，在淋巴結(jié)形成轉(zhuǎn)移灶后不僅可造成局部組織

2、的破壞，而且將成為其他臟器轉(zhuǎn)移的發(fā)源地。目前幾乎所有的專家都認(rèn)同：影響乳腺癌長(zhǎng)期生存的主要因素是轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)，根治術(shù)后局部復(fù)發(fā)機(jī)會(huì)很少；因此遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是長(zhǎng)期生存的主要障礙，其中以淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為主要途徑，因而淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與乳腺癌預(yù)后密切相關(guān)。目前關(guān)于乳腺癌患者預(yù)后評(píng)估及藥物敏感分析主要基于組織芯片，探討血清中乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)細(xì)胞因子的結(jié)構(gòu)和功能，將為腫瘤增殖轉(zhuǎn)移信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)，同時(shí)對(duì)有效抑制其遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移、利用血清判斷預(yù)后及選擇敏感

3、治療方案，為乳腺癌生物治療提供新的靶點(diǎn)均有重要意義。 研究目的： 篩選出乳腺癌患者血清中與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的細(xì)胞因子。 研究方法： 抽取240例經(jīng)病理證實(shí)的乳腺癌患者外周靜脈血，且均在在化療前采集。采用Luminex液相蛋白芯片技術(shù)檢測(cè)160例(淋巴結(jié)陰性和陽(yáng)性患者各80例)患者血清中IL-1β，IL－2，IL－1ra，IL-4，IL-5，EGF，IL-6，IL-7，TGF-α，F(xiàn)ractalkine，IL

4、-8，IL-10，IL-12p70，IL-13，IL-15，IL-17，IL-1α，INF-γ，G-CSF，GM-CSF，TNF-α，Eotaxin，MCP—1，sCD40L，IL-12p40，MIP-1α，MIP-1β，IP-10，VEGF共29個(gè)細(xì)胞因子的含量。用卡方檢驗(yàn)分析各種細(xì)胞因子在淋巴結(jié)陽(yáng)性組和淋巴結(jié)陰性組間陽(yáng)性表達(dá)率的差異，用獨(dú)立樣本T-test方法分析各種細(xì)胞因子在兩組患者血清中濃度的差異。對(duì)淋巴結(jié)陽(yáng)性組根據(jù)其陽(yáng)性淋巴結(jié)

5、數(shù)目的多少分為以下三組：1-3個(gè)，4-9個(gè)，10個(gè)及10個(gè)以上，分析已篩選出的轉(zhuǎn)移相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)強(qiáng)度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目間是否相關(guān)。根據(jù)患者在短期隨訪中有無(wú)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移將所有患者再分為兩組，分析細(xì)胞因子的表達(dá)水平與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是否相關(guān)。從上述160例樣本中隨機(jī)挑選80例并重新選取80例新樣本(篩選標(biāo)準(zhǔn)同前)，檢測(cè)該160例血清樣本中IP-10和MCP-1表達(dá)水平，驗(yàn)證該實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。 研究結(jié)果： 1.IL-1ra，MIP-1β

6、在淋巴結(jié)陰性組陽(yáng)性表達(dá)率高于淋巴結(jié)陽(yáng)性組(P<0.05)。 2.IP—10，MCP-1在淋巴結(jié)陰性組的表達(dá)水平高于淋巴結(jié)陽(yáng)性組且與患者受累淋巴結(jié)數(shù)目呈負(fù)相關(guān)(p<0.05)。 3.根據(jù)短期隨訪過(guò)程中有無(wú)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移分組發(fā)現(xiàn)MCP-1在兩組的表達(dá)水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組低于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組。Eotaxin和sCD40L在有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率也低于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組(P<0.05)。 4.對(duì)新組成的160例血清樣本中IP

7、-10和MCP-1的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，二者表達(dá)水平在淋巴結(jié)陽(yáng)性組和淋巴結(jié)陰性組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，本實(shí)驗(yàn)具有可重復(fù)性。 結(jié)論：血清中MCP-1，IP-10，IL-1ra，MIP-1β水平與患者淋巴結(jié)狀態(tài)相關(guān)。MCP-1，Eotaxin和sCD40L水平與患者有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。通過(guò)檢測(cè)血清中細(xì)胞因子的狀況對(duì)預(yù)測(cè)患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移幾率有一定的意義。Luminex液相蛋白芯片技術(shù)在大規(guī)模檢測(cè)多種細(xì)胞因子，研發(fā)新的血清預(yù)后標(biāo)志物及為乳