Erbin缺失誘導宮頸癌細胞抗失巢凋亡.pdf

1、目的:細胞極性和形態(tài)的完整性對于上皮細胞行使正常的功能至關重要，上皮細胞極性喪失及形態(tài)完整性破壞與腫瘤的惡性轉化密切相關。Erbin屬LAP蛋白家族成員，該家族在維持上皮細胞的極性及完整性中發(fā)揮重要的作用。Erbin定位于上皮細胞基底外側膜，早期研究認為，Erbin可能介導Her2受體的膜定位。但是，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，Erbin常與細胞粘附連接的組分相互作用或與某些參與細胞-基質(zhì)粘附的蛋白形成復合物，提示Erbin可能參與細胞的粘附過

2、程。近年來，Erbin作為支架分子在多條信號通路中的調(diào)控作用亦被逐一揭示。但是，Erbin具有多個蛋白質(zhì)相互作用結構域，能與這些結構域相互作用的蛋白遠未被完全發(fā)掘，Erbin的生物學功能亦遠未被人們所認識。因此，本文旨在探索Erbin在腫瘤中的生物學功能。
　　方法:應用poly-HEMA包被的培養(yǎng)板模擬體外失粘附狀態(tài)，通過流式細胞術分析Erbin缺失細胞以及對照細胞的凋亡。通過Western blot分析Erbin缺失對不同信號

3、通路分子表達和磷酸化的影響。通過雙熒光素酶報告基因分析，Erbin缺失后STAT3啟動子活性的變化。應用免疫組化染色研究Erbin在宮頸癌組織中的表達。
　　結果:在本研究中，我們通過體內(nèi)外實驗，揭示Erbin缺失能增強宮頸癌細胞抵抗失巢凋亡的能力，促進宮頸癌移植瘤在裸鼠體內(nèi)生長和轉移。在宮頸癌細胞中敲低Erbin表達，可增強IL-6誘導的STAT3磷酸化、入核及轉錄激活活性。過表達組成性激活的STAT3C或通過IL-6激活內(nèi)源性

4、的STAT3均可明顯抑制宮頸癌細胞的失巢凋亡，而JAK2/STAT3的抑制劑WP1066能逆轉Erbin缺失誘導的抗失巢凋亡，表明宮頸癌細胞中Erbin缺失誘導的抗失巢凋亡是通過活化STAT3而實現(xiàn)的。我們發(fā)現(xiàn)，IL-6在誘導STAT3活化的同時，可導致Erbin表達上調(diào)，過表達STAT3C亦可顯著誘導Erbin的表達，而JAK2的抑制劑AG490不僅能抑制STAT3的磷酸化，而且能抑制IL-6誘導的Erbin表達上調(diào)，敲低Erbin亦