趨化因子及其受體對(duì)食管鱗癌患者體內(nèi)Th17細(xì)胞分布的影響.pdf

1、[目的]
　　 研究食管鱗癌患者體內(nèi)Th17細(xì)胞的分布及其浸潤到腫瘤組織的機(jī)制。
　　 [方法]
　　 依據(jù)食管癌pTNM分期(UICC,2009)將65例食管鱗癌患者分為兩組:Ⅰ-Ⅱ期(n=42)為早期食管癌:Ⅲ期(n=23)為進(jìn)展期食管癌。(1)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測食管癌患者癌組織、癌旁組織及外周血中CD4+IL-17+細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例,并結(jié)合患者的臨床及病理資料分析食管癌患者癌組織中Th17細(xì)胞的比

2、例與臨床及病理特征的關(guān)系;(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測食管癌患者癌組織、癌旁組織及外周血中CCR2+/CCR4+/CCR6+Th17細(xì)胞占Th17細(xì)胞的比例;(3)RealtimePCR檢測癌組織及癌旁組織中相應(yīng)趨化因子CCL2、CCL17、CCL20、CCL22mRNA表達(dá)水平,采用直線回歸分析對(duì)趨化因子mRNA水平和Th17細(xì)胞的比例進(jìn)行相關(guān)性分析;(4)體外趨化實(shí)驗(yàn)檢測重組人CCL2、CCL17、CCL20、CCL22對(duì)腫瘤組織來源Th1

3、7細(xì)胞的趨化作用。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)癌組織中Th17細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例(7.6%±1.3%)顯著高于在癌旁組織中的比例(4.9%±1.1%)和外周血中的比例(3.8%±1.0%)(p＜0.001);結(jié)合臨床資料進(jìn)一步分析提示,食管癌患者癌組織中Th17細(xì)胞表達(dá)的上調(diào)與患者腫瘤的病變長度、分化程度、浸潤深度無關(guān)(p＞0.05),而與腫瘤的pTNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(p＜0.001);
　　

4、(2)在癌組織、癌旁組織及外周血中,Th17表面均表達(dá)大量CCR4(癌組織:46.2%±5.4%,癌旁組織:37.9%±5.8%,外周血:34.1%±5.6%)和CCR6(癌組織:56.3%±7.0%,癌旁組織:45.1%±6.1%,外周血:39.1%±6.9%),也有一定量CCR2表達(dá)(癌組織:23.8%±4.2%,癌旁組織:21.9%±3.40/0,外周血:22.7%±3.9%)。對(duì)三組樣本中Th17表面CCRs的表達(dá)情況分別作兩兩

5、比較,癌組織中Th17細(xì)胞表面CCR4+/CCR6+Th17細(xì)胞的比例高于癌旁組織及外周血(p＜0.001),且進(jìn)展期食管癌患者癌組織中Th17表面CCR4的表達(dá)高于早期患者(Ⅰ-Ⅱ期43.1%±4.0%vs.Ⅲ期51.4%±2.9%,p＜0.001);
　　 (3)癌組織中存在CCR4和CCR6的特異性配體CCL2、CCL17、CCL20和CCL22,這些趨化因子的mRNA水平均高于自身對(duì)照癌旁組織,且CCL17、CCL20、

6、CCL22mRNA水平與Th17細(xì)胞的比例呈正相關(guān)關(guān)系(p＜0.001);
　　 (4)重組人CCL17、CCL20、CCL22在體外對(duì)Th17有直接趨化活性,在培養(yǎng)液中加入CCL17、CCL20、CCL22單抗均可抑制此趨化效應(yīng)。
　　 [結(jié)論]
　　 (1)食管鱗癌癌組織存在Th17細(xì)胞聚集現(xiàn)象且與TNM分期有關(guān):
　　 (2)Th17細(xì)胞表面表達(dá)大量CCR4、CCR6和一定量CCR2;