苦皮藤內(nèi)生真菌A10殺菌活性成分研究.pdf

1、本論文以一株編號為A10的苦皮藤內(nèi)生真菌為出發(fā)菌株，研究了其代謝產(chǎn)物的農(nóng)用生物活性，對目標活性物質(zhì)進行分離和結(jié)構(gòu)解析，并對菌株進行了初步的鑒定，觀察了添加物質(zhì)對代謝產(chǎn)物的影響。主要結(jié)果如下： 1.對A10代謝產(chǎn)物進行了殺菌活性研究。生物測定結(jié)果表明，A10菌株發(fā)酵產(chǎn)物菌絲體的甲醇和乙酸乙酯提取物對多種病原真菌具有較強的殺菌活性。其中乙酸乙酯提取物的殺菌活性較甲醇好，在1000μg·mL-1濃度下對煙草赤星病菌、小麥根腐病菌、玉米

2、大斑病菌、番茄灰霉病菌、蘋果輪紋病菌的菌絲生長抑制率均大于90％。盆栽試驗結(jié)果表明，A10菌株發(fā)酵產(chǎn)物菌絲體的乙酸乙酯提取物在2000μg·mL-1濃度下對小麥白粉病的治療和保護作用均在70％以上。 2.根據(jù)真菌的分類及鑒定方法，用光學顯微鏡觀察A10菌株氣生菌絲、分生孢子、產(chǎn)孢細胞及菌落性狀，對比相關分類系統(tǒng)，將A10菌株初步鑒定為卵形孢霉屬(Oosporawallr)。 3.采用常壓柱層析、HPLC制備等方法，在生物

3、活性追蹤指引下，從A10菌株代謝產(chǎn)物菌絲體提取物中分離出5個化合物QY01、QY02、QY03、QY04、QY05。經(jīng)波譜技術鑒定QY01、QY04、QY05分別為細胞松弛素D，麥角甾醇，衛(wèi)矛醇，QY02和QY03由于含量低于5mg未作進一步的鑒定，但結(jié)合光譜分析，可斷定它們和QY01為同系物。在100μg·mL-1濃度時，QY01、QY02、QY03對煙草赤星病菌的活性比較高，達到50％以上。因此，我們可以初步推斷，A10菌株代謝產(chǎn)物

4、的抑菌活性主要是由這3個化合物貢獻的，其中以QY01的活性最高，它對煙草赤星病菌的EC50為35.01μg·mL-1。 4.比較溴化乙錠和2-氨基吡啶兩種添加物質(zhì)在不同的濃度下對A10菌株代謝產(chǎn)物的影響，結(jié)果表明，在添加物質(zhì)為溴化乙錠，添加濃度為0.4×10-6mg·mL-1時，A10菌株代謝的生物量和代謝產(chǎn)物細胞松弛素D均比未添加的原始培養(yǎng)液下的含量有明顯的增加，且隨著添加濃度的增大，含量均明顯上升。而添加2-氨基()的處理，