MTA1、VEGF在化療后骨肉瘤中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：研究化療后骨肉瘤組織中殘存腫瘤細(xì)胞MTA1、VEGF的表達(dá)在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及其生物學(xué)意義。探討化療后骨肉瘤中MTA1、VEGF的表達(dá)與骨肉瘤患者的臨床表現(xiàn)、化療后影像學(xué)特點(diǎn)、腫瘤細(xì)胞壞死率及預(yù)后之間的相關(guān)性，闡述二者在研究殘存骨肉瘤細(xì)胞分子生物學(xué)行為、評(píng)估患者預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療中的意義。同期采用免疫組化的方法檢測(cè)部分患者化療后骨肉瘤細(xì)胞PCNA的表達(dá)，分析與MTA1、VEGF表達(dá)、TCNR及預(yù)后的關(guān)系。 方法：回

2、顧性分析我院骨病科1999年1月～2005年12月接受新輔助化療的31例骨肉瘤患者的臨床特點(diǎn)及變化；應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)化療后骨肉瘤組織殘存腫瘤細(xì)胞中MTA1、VEGF的表達(dá)；對(duì)本組所有病人進(jìn)行平均24.7個(gè)月(5～69個(gè)月)隨訪。參照已經(jīng)建立的化療后骨肉瘤X線評(píng)分系統(tǒng)，計(jì)算化療后骨肉瘤X線評(píng)分(Thepost-chemotherapy X-ray scores，PCXS)。分析患者的臨床特點(diǎn)、腫瘤細(xì)胞壞死率、化療后X線評(píng)分以及化療后P

3、CNA的表達(dá)情況與化療后MTA1、VEGF表達(dá)的相關(guān)性。 結(jié)果： 1、化療后骨肉瘤組織中MTA1的表達(dá)在化療后骨肉瘤組織中，MTA1蛋白主要在細(xì)胞核表達(dá)，部分細(xì)胞胞漿也呈陽性反應(yīng)，呈棕黃色顆粒狀?；熀驧TA1的陽性表達(dá)率為54.84％，其表達(dá)與患者的性別、年齡、發(fā)病部位、發(fā)病.就診時(shí)間及腫瘤的體積無相關(guān)性 (P=0.092；0.214；0.058：0.624；0.270)。通過對(duì)所有病人隨訪結(jié)果的對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)MTA1

4、陽性表達(dá)的預(yù)后良好率為35.29％(6/17)，明顯低于陰性表達(dá)組(78.57％，11/17，P=0.016)。 2、化療后骨肉瘤組織中VEGF的表達(dá)化療后骨肉瘤組織中VEGF陽性顯色為棕黃色，胞漿著色，以腫瘤血管周圍的腫瘤細(xì)胞陽性表達(dá)為主?；熀骎EGF的陽性表達(dá)率為45.16％，其表達(dá)與患者的性別、年齡、發(fā)病部位、發(fā)病.就診時(shí)間及腫瘤的體積無相關(guān)性 (P=0.108；0.908；0.317：0.576；0.520)。對(duì)所有病

5、人的隨訪結(jié)果對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)VEGF陽性表達(dá)的預(yù)后良好率為33.33％(5/15)，明顯低于陰性表達(dá)(75％，12/16，P=0.032)。 3、化療后骨肉瘤組織中PCNA的表達(dá)化療后骨肉瘤組織中PCNA蛋白主要在細(xì)胞核表達(dá)，呈棕黃色顆粒狀?；熀驪CNA的陽性表達(dá)率為40％，其表達(dá)與患者的性別、年齡、發(fā)病部位、發(fā)病-就診時(shí)間及腫瘤的體積無相關(guān)性(P=0.205；0.942；0.962；0.143；0.193)。對(duì)15例病人的隨

6、訪結(jié)果對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)PCNA陽性表達(dá)的預(yù)后良好率為14.29％(1/7)，明顯低于陰性表達(dá)(75％，6/8，P=0.019)。 4、經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，本組病例中化療后骨肉瘤組織中 MTA1、VEGF 同時(shí)陽性表達(dá)的患者預(yù)后良好率為 11.11％，明顯低于二者非同時(shí)陽性表達(dá)的患者(72.73％，P=0.002)。另外在本組病例中 MTA1、PCNA同時(shí)陽性表達(dá)的患者預(yù)后均差。而VEGF、PCNA 同時(shí)陽性表達(dá)的患者預(yù)后良好率為16.6

7、7％，非同時(shí)表達(dá)的患者預(yù)后良好率為66.67％，二者同時(shí)陽性表達(dá)的預(yù)后良好率有明顯降低的趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析未發(fā)現(xiàn)二者的聯(lián)合表達(dá)與預(yù)后之間有明顯的相關(guān)性(P=0.057)，可能與本組病例數(shù)較少有關(guān)。 5、骨肉瘤的X線分型與患者的 TCNR、預(yù)后均無相關(guān)性 (P=0.668；0.595)，而化療后 X 線評(píng)分高的患者的 TCNR、預(yù)后良好率明顯高于評(píng)分低的患者，二者之間有相關(guān)性(P=0.001；0.001)。 6、骨肉瘤的三

8、種X線分型(成骨型、溶骨型及混合型)與MTA1、VEGF、PCNA的表達(dá)之間均無相關(guān)(P=0.061；0.519；0.326)。在骨肉瘤化療后X線評(píng)分≥9的病例組中MTA1的陽性表達(dá)率為33.33％，明顯低于X線評(píng)分<9的病例組MTA1的陽性表達(dá)率(75％，P=0.020)； VEGF在骨肉瘤化療后X線評(píng)分≥9的病例組中的陽性表達(dá)率為26.67％，明顯低于在X線評(píng)分<9的病例組中的陽性表達(dá)率(68.75％，P=0.019)：而PCNA在

9、骨肉瘤化療后X線評(píng)分≥9的病例組中的陽性表達(dá)率為16.67％，低于在X線評(píng)分<9的病例組中的陽性表達(dá)率(66.67％)，但二者之間無顯著性差異(P=0.057)，可能與本組病例數(shù)較少有關(guān)。 結(jié)論： 1、化療后骨肉瘤中MTA1的表達(dá)能夠反映化療后殘存腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移等分子生物學(xué)特性，是一對(duì)立于化療療效影響病人預(yù)后的因素。通過檢測(cè)化療后骨肉瘤中MFA1的表達(dá)有助于評(píng)價(jià)化療后殘存骨肉瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能，更準(zhǔn)確的判斷患者的預(yù)后

10、，指導(dǎo)骨肉瘤的臨床治療。 2、VEGF在化療后骨肉瘤中的表達(dá)通過促使化療后殘存腫瘤灶微血管的形成并增加腫瘤血管的通透性，增加了腫瘤細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移的機(jī)率?；熀骎EGF的表達(dá)，能反映化療后腫瘤新生MV的密度，和化療后骨肉瘤細(xì)胞的侵襲能力，可以作為評(píng)估患者預(yù)后的有價(jià)值的分子生物學(xué)指標(biāo)。 3、通過檢測(cè)PCNA在化療后骨肉瘤組織中的表達(dá)能夠反映化療后殘存骨肉瘤細(xì)胞的增殖能力，預(yù)測(cè)和評(píng)估患者的預(yù)后。 4、MTA1、VE

11、GF、PCNA在化療后骨肉瘤中的表達(dá)之間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性，但三者協(xié)同表達(dá)的患者預(yù)后更差。表明同時(shí)檢測(cè)三者在化療后骨肉瘤中的表達(dá)能從不同側(cè)面了解化療后殘存骨肉瘤細(xì)胞的分子生物學(xué)行為，有助于評(píng)價(jià)患者的預(yù)后。 5、骨肉瘤化療后的影像學(xué)征象是以腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為為基礎(chǔ)的。并且化療后骨肉瘤X線評(píng)分與患者的預(yù)后有相關(guān)性，通過分析化療后影像學(xué)征象可以預(yù)測(cè)患者的預(yù)后，指導(dǎo)臨床采用正確的治療方法，進(jìn)一步證明了該評(píng)分系統(tǒng)的臨床應(yīng)用可行性。 意義

12、：目前研究骨肉瘤基因表達(dá)的生物學(xué)意義多采用化療前骨肉瘤標(biāo)本，但隨著新輔助化療的應(yīng)用，化療-手術(shù)-化療成了骨肉瘤保肢治療的標(biāo)準(zhǔn)方案，從而化療前標(biāo)本的獲得只有靠術(shù)前穿刺活檢，但穿刺活檢的標(biāo)本量少，難以滿足臨床科研中對(duì)相關(guān)基因的檢測(cè)。本研究采用化療后手術(shù)切除標(biāo)本，證實(shí)了采用化療后標(biāo)本檢測(cè)骨肉瘤相關(guān)基因表達(dá)的可行性。有關(guān)MTA1、VEGF的表達(dá)在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及意義的研究國內(nèi)外報(bào)道較少，對(duì)二者在化療后骨肉瘤中表達(dá)及聯(lián)合表達(dá)尚未見報(bào)道，

13、而且對(duì)于評(píng)價(jià)化療后骨肉瘤殘存腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的研究報(bào)道甚少。本研究采用免疫組化的方法檢測(cè)了MTA1、VEGF在化療后骨肉瘤標(biāo)本中的表達(dá)，結(jié)合患者的臨床特點(diǎn)、化療后影像學(xué)表現(xiàn)以及腫瘤細(xì)胞壞死率，評(píng)價(jià)MTA1、VEGF的表達(dá)與上述諸因素及預(yù)后的相關(guān)性，探討二者在了解殘存骨肉瘤細(xì)胞分子生物學(xué)行為、預(yù)后評(píng)估、指導(dǎo)治療中的意義。通過研究化療后骨肉瘤的X線評(píng)分與MTA1、VEGF、PCNA及病人的預(yù)后之間的關(guān)系，闡述了分析骨肉瘤化療后的X線征象具