鈣信號(hào)通路在DADS誘導(dǎo)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、南華大學(xué)碩士學(xué)位論文鈣信號(hào)通路在DADS誘導(dǎo)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究姓名：唐海林申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：蘇琦200705011鈣信號(hào)通路在鈣信號(hào)通路在DADS誘導(dǎo)人鼻咽癌誘導(dǎo)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究碩士研究生：唐海林碩士研究生：唐海林導(dǎo)師：蘇琦教授師：蘇琦教授中文摘要中文摘要目的：目的：研究二烯丙基二硫（diallyldisulfideDADS）抑制人鼻咽癌CNE2細(xì)胞增

2、殖和誘導(dǎo)凋亡作用，探討細(xì)胞內(nèi)游離鈣（freecalciumCa2）、活性氧(reactiveoxygenspeciesROS)、Bcl2、Bax以及Caspase3的變化在DADS誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。方法：方法：采用形態(tài)學(xué)觀察、MTT法、流式細(xì)胞術(shù)和DNA瓊脂糖凝膠電泳等方法，觀察DADS對(duì)體外培養(yǎng)的CNE2細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、誘導(dǎo)凋亡作用以及細(xì)胞內(nèi)Ca2、ROS的變化。免疫細(xì)胞化學(xué)及Westernblot檢測(cè)Bcl2、Bax和

3、Caspase3蛋白的表達(dá)。結(jié)果：結(jié)果：形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，DADS處理CNE2細(xì)胞24h后，部分細(xì)胞變圓，體積明顯縮小，胞質(zhì)強(qiáng)嗜酸性，核固縮、深染，核染色質(zhì)積聚至核膜周邊，呈現(xiàn)凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。MTT結(jié)果顯示，50、100、200、400molL1DADS作用CNE2細(xì)胞48h后，抑制率分別為3.66%、14.25%、29.66%和61.28%，呈現(xiàn)濃度依賴性關(guān)系(P0.05)。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，50、100、200、400molL1

4、DADS作用CNE2細(xì)胞24h，凋亡率分別為10.81.3%、14.81.1%、21.72.0%及30.82.6%，呈濃度依賴性誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞凋亡（P0.05）。200及400molL1DADS分別作用CNE2細(xì)胞24h后，DNA凝膠電泳出現(xiàn)典型梯形條帶。免疫細(xì)胞化學(xué)及灰度掃描分析顯示，200molL1DADS作用CNE2細(xì)胞24h后，Bcl2蛋白表達(dá)明顯減弱，平均光密度值由5.220.74下降至1.070.08；Bax蛋白表達(dá)明顯增