運動促進(jìn)2型糖尿病大鼠骨骼肌細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、第一部分 目的：研究運動對2型糖尿病模型OLETF大鼠血糖、血脂、胰島素水平的影響，探討運動對2型糖尿病大鼠的影響，以及運動對改善糖尿病大鼠脂代謝紊亂的機(jī)制。 方法：對32只自發(fā)發(fā)病的2型糖尿病模型OLETF大鼠和13只LETO大鼠進(jìn)行為期12周的運動干預(yù)，12周后用放免法檢測空腹血漿胰島素含量；酶法檢測血漿甘油三酯和膽固醇水平。 結(jié)果：經(jīng)12周游泳訓(xùn)練后，0min，30min，60min，120min OLET

2、F運動組和OLETF非運動組血糖差異無顯著性；0min，30min，60min LETO大鼠運動組與LETO非運動組比較，血糖差異無顯著性；OLETF大鼠運動組血清甘油三脂濃度明顯低于其相對應(yīng)的非運動組(P<0.05)，而LETO大鼠運動組與其非運動組比較，甘油三脂濃度的差異無顯著性；OLETF運動組和OLETF非運動組比較，膽固醇濃度明顯降低(P<0.05)；而LETO大鼠運動組與其非運動組比較，膽固醇濃度的差異無顯著性；OLETF運

3、動組和OLETF非運動組比較，血胰島素濃度明顯的降低(P<0.05)，胰島素敏感指數(shù)增高(P<0.05)； 結(jié)論：運動能改善糖尿病大鼠的脂代謝紊亂，降低甘油三脂和膽固醇濃度，能降低血胰島素的濃度，增加胰島素敏感性。 第二部分 目的：探討耐力運動對糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖運載體4(glucosetransporteI 4，GLUT4)mRNA表達(dá)的影響。 方法:32只雄性2型糖尿病OLETF大鼠和13只雄性對

4、照LETO大鼠。隨機(jī)分為6組：A1組為OLETF運動組(8只)、A2組為OLETF運動+胰島素組(8只)、B1組為OLETF非運動組(8只)、B2組為0LETF非運動+胰島素組(8只)、C組為LETO運動組(6只)、D組為LETO非運動組(6只)。A1、A2、C組參照Ploug報道的大鼠游泳運動方法，共運動12周。A2、B2組在處死前經(jīng)肝門靜脈給予胰島素10U/Kg的即刻注射，1分鐘后處死，取材。血糖儀測定糖耐量；Real-time P

5、CR方法測定骨骼肌GLUT4mRNA。 結(jié)果：B1組比D組GLUT4 mRNA降低，差異有顯著性(P<0.01)；A1組比B1組GLUT4 tuRNA升高3倍，差異有顯著性(P<0.01)；A2組比A1組GLUT4 mRNA升高13倍，差異有顯著性(P<0.05)； B2組比B1組GLUT4 mRNA升高20倍，差異有顯著性(P<0.01)；A2組比B2組GLUT4 mRNA升高2倍，但差異無顯著性，；C組比D組GLUT4 mR

6、NA升高，但差異無顯著性。 結(jié)論:運動可以促進(jìn)GLUT4 mRNA的表達(dá)，運動和胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運機(jī)制不一樣，運動和胰島素對糖尿病治療具有協(xié)同作用，兩者不能相互替代。 第三部分 目的:觀察運動對正常大鼠和2型糖尿病大鼠骨骼肌中GLUT4蛋白表達(dá)的影響，探討運動促進(jìn)正常大鼠和2型糖尿病大鼠骨骼肌細(xì)胞攝取葡萄糖增加的可能機(jī)制。 方法:32只雄性2型糖尿病0LETF大鼠和13只雄性對照LETO大鼠。隨機(jī)分為

7、6組：A1組為0LETF運動組(8只)、A2組為OLETF運動+胰島素組(8只)、B1組為OLETF非運動組(8只)、B2組為0LETF非運動+胰島素組(8只)、C組為LETO運動組(6只)、D組為LETO非運動組(6只)。A1、A2、C組參照P10ug報道的大鼠游泳運動方法，共運動12周。A2、B2組在處死前經(jīng)肝門靜脈給予胰島素10u/Kg的即刻注射，1分鐘后處死，取材。然后采用Western blot法對大鼠股四頭肌中GLUT4蛋白

8、進(jìn)行檢測。 結(jié)果:耐力運動后大鼠骨骼肌中的GLUT4蛋白表達(dá)分別進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示：糖尿病非運動組比正常非運動組GLUT4蛋白表達(dá)降低(P<0.05)，糖尿病運動組比糖尿病非運動組GLUT4蛋白表達(dá)升高(P<0.05)，糖尿病非運動+胰島素組比糖尿病非運動組GLUT4蛋白表達(dá)升高(P<0.05)，糖尿病非運動+胰島素組比糖尿病運動組表達(dá)升高(P<0.05)，糖尿病運動+胰島素組比糖尿病非運動+胰島素組GLUT4蛋白表達(dá)升高(P

9、<0.05)。 結(jié)論:運動可以促進(jìn)GLUT4蛋白的表達(dá)，胰島素注射可以促進(jìn)GLUT4蛋白的表達(dá)，但是胰島素注射的促進(jìn)作用要強(qiáng)于運動，胰島素注射和運動對促進(jìn)GLUT4蛋白的表達(dá)有協(xié)同作用。 第四部分 目的:觀察運動對正常大鼠和運動、胰島素對2型糖尿病大鼠骨骼肌中蛋白激酶B(protein kinase B，PKB/Akt)和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellular regulated protein k

10、inase 1/2，ERK1/2)的蛋白表達(dá)和活性的影響，探討運動促進(jìn)正常大鼠和2型糖尿病大鼠骨骼肌細(xì)胞GLUT4表達(dá)和攝取葡萄糖增加的可能機(jī)制。 方法：32只雄性2型糖尿病OLETF大鼠和13只雄性對照LETO大鼠。隨機(jī)分為6組：A1組為OLETF運動組(8只)、A2組為OLETF運動+胰島素組(8只)、B1組為OLETF非運動組(8只)、B2組為OLETF非運動+胰島素組(8只)、c組為LETO運動組(6只)、D組為LETO

11、非運動組(6只)。A1、A2、C組參照Ploug報道的大鼠游泳運動方法，共運動12周。A2、B2組在處死前經(jīng)肝門靜脈給予胰島素10u/Kg的即刻注射，1分鐘后處死，取材。然后采用Western blot法對大鼠股四頭肌中PKB/Akt和ERKI/2蛋白進(jìn)行檢測。 結(jié)果:糖尿病大鼠運動組骨骼肌中磷酸化PKB/AKt、磷酸化ERK1/2蛋白比糖尿病大鼠非運動組明顯升高(P<0.05)；正常大鼠運動組骨骼肌中磷酸化PKB/AKt、磷酸

12、化ERK1/2蛋白比正常大鼠非運動組增高；糖尿病非運動+胰島素組骨骼肌中磷酸化PKB/AKt、磷酸化ERK1/2蛋白比糖尿病非運動組增高；糖尿病運動+胰島素組骨骼肌中磷酸化PKB/AKt、磷酸化ERK1/2蛋白比糖尿病運動組增高；同時，比較糖尿病運動組和糖尿病非運動+胰島素注射組磷酸化PKB/AKt、磷酸化ERK1/2蛋白的表達(dá)，后者要高于前者。 結(jié)論:運動可以促進(jìn)正常大鼠、2型糖尿病大鼠磷酸化PKB/AKt、磷酸化ERK1/2