光信號(hào)在微生物區(qū)分與藥物抗菌活性研究中的應(yīng)用.pdf

1、眾所周知，通過物質(zhì)對(duì)光的吸收、散射和發(fā)熒光、發(fā)磷光等現(xiàn)象，可以對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量測(cè)定。本文主要利用從熒光分光光度計(jì)上獲得的光散射信號(hào)對(duì)微生物進(jìn)行了區(qū)分，利用流式細(xì)胞儀上獲得的熒光信號(hào)研究了改性頭孢噻肟和細(xì)胞型朊蛋白(PrPc)的抑菌活性。具體研究?jī)?nèi)容如下： 1、利用光散射信號(hào)對(duì)微生物進(jìn)行區(qū)分 光的散射信號(hào)發(fā)生在光與粒子的相互作用過程中，它與散射粒子的大小、形態(tài)、折光指數(shù)等方面有關(guān)。本文在配有偏振片的普通熒光分光光度計(jì)上

2、保持激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)相等，通過同時(shí)掃描激發(fā)和發(fā)射單色器獲得的光散射光譜對(duì)大腸桿菌Escherichia coli(E．coli)的2種不同菌株：Ecoli(DH5a)，Ecoli(BL-21)進(jìn)行了探索性研究。結(jié)果表明，偏振同步光散射可以區(qū)分、表征這西種微生物，該方法簡(jiǎn)便、靈敏、快速。 2、利用流式細(xì)胞儀上獲得的熒光信號(hào)研究藥物的抑菌活性 流式細(xì)胞儀既可以檢測(cè)樣品的散射信號(hào)，也可以檢測(cè)樣品的熒光信號(hào)。本文利用流式細(xì)胞儀上獲

3、得的熒光信號(hào)對(duì)藥物的抑菌活性進(jìn)行了研究。 (1)在頭孢噻肟(Cefotaxime Sodium)7位側(cè)鏈的氨基上通過戊二醛的偶聯(lián)作用修飾上殼聚糖，將修飾及朱修飾的頭孢噻肟分別與金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.aureus)孵育后，用碘化丙錠(Propidium Iodide，PI)染色，然后利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)樣品熒光強(qiáng)度的變化。結(jié)果表明，頭孢噻肟改性后對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌活性增強(qiáng)了。本文同時(shí)研究

4、了不同溫度對(duì)頭孢噻肟改性后抑菌活性的影響，發(fā)現(xiàn)在60℃下所得的改性頭孢噻肟的抑菌活性最強(qiáng)。另外也研究了改性頭孢噻肟在不同濃度和不同作用時(shí)間下與S.aureus的作用情況，這將為臨床給藥提供一定依據(jù)。 (2)利用流式細(xì)胞儀探索了細(xì)胞型朊蛋白(PrPc)對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis，B．subtilis)、巨大芽孢桿菌(Bacill

5、us megaterium,B，megaterium)、蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis,B．thuringiensis)、大腸桿菌[Escherichia coli(BL-21)，E．coli(BL-21)]這五種隨機(jī)所選細(xì)菌的抑菌活性，結(jié)果表明，細(xì)胞型朊蛋白(PrPc)對(duì)S.aureus和B．subtilis具有明顯的抑制活性，而對(duì)B．megaterium，B．thuringiensis和E．coli(B