激素受體與HER2在乳腺癌不同制片技術(shù)中的表達(dá)水平比較及其臨床意義研究.pdf

1、目的:
　　 雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)在乳腺癌的形成、發(fā)展和對(duì)激素反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。ER或PR陽性的乳腺癌病例均可采用內(nèi)分泌治療。HER2基因表達(dá)的蛋白c-erbB-2作為乳腺癌的預(yù)后指標(biāo)、治療反應(yīng)預(yù)測(cè)指標(biāo)和治療靶點(diǎn)起作用,抗HER2單克隆抗體Herceptin治療乳腺癌被廣泛應(yīng)用,明顯地延長(zhǎng)乳腺癌患者的生存時(shí)間和改善生活質(zhì)量。由于內(nèi)分泌治療和新輔助化療的出現(xiàn)和廣泛應(yīng)用,以及化療后激素受體的表達(dá)水平可能與化療前不一

2、致,所以術(shù)前檢測(cè)乳腺癌ER、PR的表達(dá)水平顯得更為重要。細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)于乳腺癌術(shù)前診斷是一項(xiàng)簡(jiǎn)單而實(shí)用的檢查項(xiàng)目,可用于檢測(cè)ER、PR和c-erbB-2表達(dá)。但由于細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)的原因,其檢測(cè)結(jié)果尚不十分穩(wěn)定,尤其是不利于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)抗體。
　　 雄激素受體(AR)在前列腺癌中的研究較多,但在乳腺癌中的生物學(xué)作用一直是臨床上和基礎(chǔ)研究中被忽略的領(lǐng)域。AR在乳腺癌中表達(dá)的臨床意義尚無肯定的結(jié)論。AR的表達(dá)水平是否與乳腺癌的生

3、物學(xué)行為有關(guān),AR與ER、PR和c-erbB-2之間的表達(dá)是否存在相關(guān)性,AR在不同乳腺癌分子分型中的表達(dá)水平是否存在差別等問題,目前尚無滿意的答案。
　　 本文旨在改進(jìn)傳統(tǒng)免疫細(xì)胞化學(xué)制片方法,提高乳腺癌術(shù)前ER、PR和c-erbB-2檢測(cè)結(jié)果的可靠性;采用組織芯片技術(shù)檢測(cè)乳腺癌AR的表達(dá)水平并探討其臨床意義。
　　 方法:
　　 對(duì)50例乳腺癌病例進(jìn)行細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查,檢查前簽署知情同意書,穿刺獲得細(xì)胞學(xué)標(biāo)

4、本后分別進(jìn)行傳統(tǒng)涂片和液基細(xì)胞制片,然后進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,并對(duì)手術(shù)后的標(biāo)本進(jìn)行免疫組化染色,分別比較ER、PR和c-erbB-2在不同制片方法中的表達(dá)水平。液基細(xì)胞學(xué)制片采用利普液基細(xì)胞學(xué)產(chǎn)品,免疫組化制片采用SP法。
　　 采用組織芯片技術(shù)把200例乳腺癌手術(shù)標(biāo)本制成二個(gè)組織芯片,每個(gè)組織芯片包含100個(gè)乳腺癌位點(diǎn),采用免疫組化法En Vision法分別檢測(cè)每個(gè)乳腺癌組織芯片中AR、ER、PR和c-erbB-2的表達(dá)水平,

5、分析AR與乳腺癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系以及AR與ER、PR、c-erbB-2和乳腺癌分子分型的關(guān)系。
　　 AR、ER、PR免疫組化染色結(jié)果判斷采用半定量法,≥10％細(xì)胞核著色視為陽性反應(yīng)。根據(jù)染色強(qiáng)度分為陰性、弱陽性、中等陽性和強(qiáng)陽性,相應(yīng)評(píng)分為0、1、2和3分。觀察每張切(涂)片中陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)與陽性強(qiáng)度的乘積即為免疫反應(yīng)得分,范圍為0-300分。免疫反應(yīng)得分10分以上視為陽性反應(yīng)。按照乳腺癌HER2檢測(cè)指南,c

6、-erbB-2蛋白的評(píng)分0、1+視為陰性,3+視為陽性,2+進(jìn)行FISH檢測(cè),陽性信號(hào)和對(duì)照信號(hào)的比值大于2.2視為HER2基因擴(kuò)增。
　　 ER和PR在液基細(xì)胞涂片、傳統(tǒng)涂片和組織切片中的陽性表達(dá)率的比較采用X2檢驗(yàn),AR與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系以及與乳腺癌分子分型的關(guān)系采用X2檢驗(yàn),c-erbB-2在液基細(xì)胞涂片、傳統(tǒng)涂片和組織切片中的表達(dá)水平的差異用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn),P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7、r>　　 結(jié)果:
　　 在液基細(xì)胞涂片中腫瘤細(xì)胞呈散在或彌漫分布,背景清晰,易于觀察和判斷。在傳統(tǒng)細(xì)胞涂片中腫瘤細(xì)胞呈團(tuán)塊狀或成片分布,背景中充滿大量紅細(xì)胞和壞死物等引起的非特異性著色,對(duì)觀察和判斷造成一定的干擾。液基細(xì)胞涂片、傳統(tǒng)涂片和石蠟切片的ER陽性表達(dá)率分別為54％(27/50)、50％(25/50)和56％(28/50),PR的表達(dá)率分別為44％(22/50)、38％(19/50)和52％(26/50),c-erbB

8、-2中等強(qiáng)度以上陽性表達(dá)率分別為58％(29/50)、54％(27/50)和52(26/50)。ER、PR和c-erbB-2在三種制片方法的乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 乳腺癌AR的陽性表達(dá)率為64.5％(129/200),AR在乳腺癌中的表達(dá)與年齡、月經(jīng)狀況、腫瘤部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤組織學(xué)類型、腫瘤TNM分期、是否浸潤(rùn)以及原位癌級(jí)別無明顯相關(guān)性(P＞0.05),而與腫瘤體積和浸潤(rùn)性癌的組織學(xué)分級(jí)

9、有關(guān)(P＜0.05)。多數(shù)ER和PR陽性的腫瘤同時(shí)也表達(dá)AR,114例ER陽性的病例中有99例(86.84％)AR也呈陽性表達(dá),90例PR陽性的病例中77例(85.56％)AR陽性表達(dá)。AR的表達(dá)與ER和PR呈明顯的相關(guān)性(P＜0.05)。AR在不同分子分型的乳腺癌中的表達(dá)率不同,在腺管A型和腺管A-HER2型中的表達(dá)率最高,腺管B型和腺管B-HER2型次之,而在HER2型和三陰性中最低(P＜0.05)。
　　 結(jié)論: