強(qiáng)脈沖光照射對(duì)UVAⅠ誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞光損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、紫外線(xiàn)輻射（ultraviolet radiation,UV）對(duì)正常人類(lèi)皮膚的損傷包括日曬傷，光老化，免疫抑制及皮膚癌癥，其中皮膚的光損傷導(dǎo)致老化是近年來(lái)皮膚研究領(lǐng)域中的熱門(mén)課題之一。近年來(lái)新開(kāi)展了光子嫩膚技術(shù)，臨床療效觀察發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)脈沖光（intense pulsed light,IPL）照射能使色素斑減淡/消除、毛細(xì)血管擴(kuò)張改善/消除、細(xì)小皺紋消除，并且具有輕微的緊致皮膚作用等功效。因此本課題根據(jù)當(dāng)前熱點(diǎn)問(wèn)題，從細(xì)胞生物學(xué)層面研究強(qiáng)脈

2、沖光對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞(fibroblast，F(xiàn)B)的生長(zhǎng)活力、細(xì)胞增殖能力以及細(xì)胞周期變化的影響并探討其可能的發(fā)生機(jī)制，為強(qiáng)脈沖光除皺嫩膚提供可能的理論依據(jù)。
　　我們?nèi)≌和そM織，分離培養(yǎng)原代人皮膚成纖維細(xì)胞，給以UVAI照射模擬光損傷。應(yīng)用CCK-8（Cell Counting Kit-8）比色法、流式細(xì)胞儀(Flow Cytometry，F(xiàn)CM)分析技術(shù)和western blot技術(shù)，觀察皮膚成纖維細(xì)胞經(jīng)強(qiáng)脈沖光照射

3、后細(xì)胞的生長(zhǎng)活力、細(xì)胞增殖能力以及細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：
　　（1）體外實(shí)驗(yàn)中，9J/cm2劑量的UVAI照射后第48h出現(xiàn)增殖變緩，有損傷作用。以9J/cm2的劑量UVAⅠ照射后48h時(shí)，即可觀察到細(xì)胞增殖活性出現(xiàn)了下降，隨后的各時(shí)間點(diǎn)內(nèi)與對(duì)照組相比，增殖活性明顯減小，P<0.05。臨床劑量IPL照射FB第72h之后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞增殖活性明顯升高，P<0.01。FB經(jīng)UVAⅠ照射后再給IPL處理后，其增殖活性明

4、顯優(yōu)于單獨(dú)UVAⅠ處理組，P<0.05。
　　（2）單獨(dú)UVAI或IPL照射48h后，G1期細(xì)胞比例下降，而S期細(xì)胞比例升高。UVAⅠ照射后再給以IPL處理，其S期高于單獨(dú)UVAⅠ照射組，同時(shí)G1期細(xì)胞低于UVAI單獨(dú)照射組，p<0.05。
　?。?）單獨(dú)UVAI照射細(xì)胞48h后，細(xì)胞周期相關(guān)蛋白CyclinD1和CDK2的表達(dá)下降，而UVA+IPLⅠ照射后，CyclinD1和CDK2表達(dá)雖然低于對(duì)照組，但明顯較單獨(dú)UVAⅠ