雌激素和沐舒坦對(duì)大鼠膈疝模型肺發(fā)育的影響.pdf

1、目的：通過(guò)除草醚(Nitrofen)誘導(dǎo)的SD大鼠膈疝模型，初步評(píng)價(jià)雌二醇(estradiol，E2)和沐舒坦產(chǎn)前干預(yù)對(duì)先天性膈疝(congenital diaphragmatichernia，CDH)肺發(fā)育不良的影響及可能的機(jī)制。
　　材料與方法：
　　1.雌二醇干預(yù)實(shí)驗(yàn)：11只孕9.5天的大鼠隨機(jī)分為三組：對(duì)照組(C1組，n=2)僅給與橄欖油灌胃，膈疝組(N1組，n=3)及雌二醇組(E組，n=6)給予除草醚200mg灌胃

2、。孕18.5、19.5、20.5天，C1組及N1組分別皮下注射橄欖油，E組每日皮下注射17-β雌二醇0.2mg/kg。孕21天行剖宮產(chǎn)，觀察各組膈疝發(fā)生率，行HE、彈力纖維染色，檢測(cè)雙肺濕重/體重(1ung weight to body weight，Lw/Bw)、平均終末支氣管密度(mean terminal branch density，MTBD)、肺泡面積百分比(percentage of alveolar area，S％)、中小

3、動(dòng)脈中膜厚度百分比(percentage ofwall thickness，MT％)；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factorβ1，TGF-β1)免疫組化染色，檢測(cè)TGF-β1在肺及小動(dòng)脈的表達(dá)強(qiáng)度；實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)。TGF-β1、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體Ⅰ(transforming growth factorβ receptorI，Tβ R I)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子受體Ⅱ(transforming growth fac

4、tor B receptorⅡ，Tβ RⅡ)的mRNA水平。
　　2.沐舒坦干預(yù)實(shí)驗(yàn)：9只孕9.5天的大鼠隨機(jī)分為三組：對(duì)照組(C2組，n=2)僅給與橄欖油灌胃，膈疝組(N2組，n=2)及沐舒坦組(A組，n=5)給與除草醚200mg灌胃。孕18.5、19.5、20.5天，C2組及N2組分別腹腔注射生理鹽水，A組每日腹腔注射沐舒坦100mg/kg。孕21天行剖宮產(chǎn)，觀察各組膈疝發(fā)生率，行HE、彈力纖維染色及TGF-β1免疫組化染色，

5、檢測(cè)雙肺濕重/體重(Lw/Bw)、平均終末支氣管密度(MTBD)、肺泡面積百分比(S％)、中小動(dòng)脈中膜厚度百分比(MT％)和TGF-β1在肺組織中的表達(dá)強(qiáng)度。
　　結(jié)果：
　　1.雌激素干預(yù)實(shí)驗(yàn)：C1組無(wú)膈疝發(fā)生，N1組膈疝發(fā)生率為62.1％，E組為66.1％。后兩組間沒(méi)有差異。E組發(fā)育居中。N1組Lw/Bw、S％較C1組減少，MTBD、MT％較C1組增高；而E組LW/Bw、S％較N1組有所升高，MTBD、MT％明顯下降。N

6、1組TGF-β1在肺及中小動(dòng)脈的表達(dá)強(qiáng)度較C1組明顯升高(P<0.05)，E組該值較N1組下降(P<0.05)，實(shí)時(shí)熒光定量表明N1組TGF-β1、Tβ R I mRNA較C1組明顯增多(P<0.05)，E組較N，組有所下降。
　　2.沐舒坦干預(yù)實(shí)驗(yàn)：C2組無(wú)膈疝發(fā)生；N2組膈疝發(fā)生率為68.4％，A組為65.1％，兩組間沒(méi)有差異(P=0.502)。C2組肺發(fā)育成熟，N2組處于假腺體期，A組發(fā)育居中。N2組Lw/Bw、S％較C2組

7、減少(P<0.01)，MTBD、MT％較C2組增高(P<0.01)：而A組Lw/Bw、S％較N2組有所升高(P<0.01)，MTBD、MT％明顯下降(P<0.01)。N2組TGF-β1在肺中的表達(dá)強(qiáng)度較C2組明顯升高(P<0.05)，A組較N2組下降(P<0.05)
　　結(jié)論：
　　1.雌二醇不影響膈疝的發(fā)生率，但在一定程度能促進(jìn)膈疝胎肺發(fā)育、改善肺小動(dòng)脈發(fā)育不良；抑制TGF-β通路活性，是其可能的作用機(jī)制之一。