宿主蛋白TvbS3對(duì)傳染性法氏囊病病毒復(fù)制影響的研究.pdf

1、雞傳染性法氏囊?。↖nfectious Bursal Disease，IBD）是由傳染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease Virus，IBDV）引起的主要危害雛雞的一種急性、高度接觸性、致死性傳染病。IBDV主要侵害雛雞的中樞免疫器官-法氏囊，感染后病毒粒子的大量復(fù)制導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞的裂解和缺失，耐過(guò)雞往往產(chǎn)生嚴(yán)重免疫抑制，進(jìn)而引起疫苗免疫失敗、增加對(duì)其它病原的易感性，嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展。
　　

2、IBDV是雙RNA病毒科、禽雙RNA病毒屬的典型代表，其基因組由A、B兩個(gè)節(jié)段組成，A節(jié)段全長(zhǎng)約為3200bp，B節(jié)段全長(zhǎng)約為2800bp，共編碼5種蛋白。其中VP2是IBDV主要的結(jié)構(gòu)蛋白，是病毒衣殼的唯一組分，其分子表面攜帶有病毒的主要宿主保護(hù)性抗原，決定IBDV的細(xì)胞嗜性和毒力。病毒侵染宿主的第一步，是通過(guò)與細(xì)胞受體的互作而結(jié)合易感細(xì)胞。雖然已有幾個(gè)蛋白被鑒定可影響IBDV的侵染，然而IBDV的細(xì)胞受體及其具體效應(yīng)機(jī)制至今仍未被明

3、確。
　　本研究首先提取雞的B淋巴細(xì)胞膜蛋白，利用IBDV衣殼蛋白VP2的單克隆抗體通過(guò)免疫沉淀技術(shù)篩選互作蛋白。質(zhì)譜分析結(jié)果提示，宿主蛋白TvbS3與IBDV可能存在相互作用；并且熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示，IBDV感染易感細(xì)胞DF1和SPF雞后，細(xì)胞內(nèi)TvbS3的轉(zhuǎn)錄水平均上調(diào)，提示TvbS3可能在IBDV感染過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
　　TvbS3是禽白血病病毒B亞群（ALV-B）和D亞群(ALV-D)的受體蛋白，屬于腫

4、瘤壞死因子受體（TNFR）超家族，是Ⅰ型跨膜蛋白，其胞內(nèi)區(qū)含有死亡結(jié)構(gòu)域，通過(guò)與其配體或抗體結(jié)合后而被激活，能引起細(xì)胞凋亡。為了進(jìn)一步驗(yàn)證TvbS3在IBDV侵染易感細(xì)胞過(guò)程中的作用，本研究克隆了雞源TvbS3基因，并系統(tǒng)地從病毒蛋白表達(dá)和病毒滴度水平，研究了宿主蛋白TvbS3對(duì)IBDV復(fù)制的影響。結(jié)果顯示，TvbS3上調(diào)表達(dá)促進(jìn)IBDV復(fù)制，TvbS3被小分子干擾RNA(siRNA)敲低則抑制IBDV復(fù)制，這說(shuō)明TvbS3是IBDV侵