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1、目的:研究胃動(dòng)素對(duì)大鼠弓狀核胃擴(kuò)張反應(yīng)神經(jīng)元放電活動(dòng)和胃運(yùn)動(dòng)的影響,探討弓狀核參與調(diào)控胃運(yùn)動(dòng)的機(jī)制。
方法:1.電生理實(shí)驗(yàn)方法:應(yīng)用四管玻璃微電極細(xì)胞外記錄麻醉大鼠弓狀核神經(jīng)元自發(fā)放電,用水囊充盈胃鑒別胃擴(kuò)張敏感神經(jīng)元,以壓力注射儀經(jīng)玻璃微電極,對(duì)核團(tuán)內(nèi)單個(gè)神經(jīng)元分別微量注射給予:(1)胃動(dòng)素、生理鹽水(對(duì)照組)(2)胃動(dòng)素、GM-109(胃動(dòng)素受體拮抗劑)觀察藥物對(duì)神經(jīng)元單位放電的影響。2.應(yīng)用核團(tuán)微量注射法,記錄清醒自
2、由活動(dòng)大鼠胃運(yùn)動(dòng),觀察向大鼠弓狀核內(nèi)分別微量注射胃動(dòng)素和胃動(dòng)素受體拮抗劑GM-109后,對(duì)清醒自由活動(dòng)大鼠胃運(yùn)動(dòng)的變化。3.應(yīng)用熒光免疫組織化學(xué)方法觀察胃動(dòng)素免疫反應(yīng)性神經(jīng)元在弓狀核的表達(dá)。
結(jié)果:(1)電生理實(shí)驗(yàn)結(jié)果:在35只大鼠中,記錄到110個(gè)的神經(jīng)元為胃擴(kuò)張敏感性神經(jīng)元,其中55.6%呈GD興奮反應(yīng),為胃擴(kuò)張興奮性神經(jīng)元(GD-E):44.4%呈GD抑制反應(yīng),為GD抑制性神經(jīng)元(GD-I)。胃擴(kuò)張后,GD-E神經(jīng)元
3、放電頻率由3.18±1.01Hz增至5.62±1.22Hz(P<0.01),而且GD-I神經(jīng)元放電頻率由3.21±0.68Hz降至1.24±0.31Hz(P<0.01)。弓狀核內(nèi)壓力注射胃動(dòng)素后,70%的GD-E神經(jīng)元表現(xiàn)為興奮作用,17.5%表現(xiàn)為抑制作用,并且放電頻率由3.46±1.59Hz增至8.83±2.25Hz(P<0.05):而注射胃動(dòng)素后,65.6%的GD-I神經(jīng)元表現(xiàn)為興奮作用,放電頻率由3.34±0.63Hz增至6.1
4、7±0.97Hz(P<0.05)。而這種由胃動(dòng)素誘導(dǎo)的興奮作用被胃動(dòng)素受體拮抗劑GM-109阻斷。
(2)胃運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn):弓狀核內(nèi)微量注射胃動(dòng)素可增強(qiáng)清醒大鼠胃運(yùn)動(dòng),其反應(yīng)與注入的胃動(dòng)素濃度呈劑量依賴關(guān)系;弓狀核內(nèi)先單獨(dú)注入胃動(dòng)素受體拮抗劑(GM-109)可阻斷由胃動(dòng)素誘導(dǎo)的對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的增強(qiáng)作用。
(3)熒光免疫組化實(shí)驗(yàn):經(jīng)過(guò)胃擴(kuò)張后,弓狀核內(nèi)胃動(dòng)素免疫反應(yīng)性神經(jīng)元數(shù)量增多,由10.920.48cells/mm2增
5、至43.68±0.44cells/mm2(P<0.05)。
結(jié)論:下丘腦弓狀核內(nèi)存在對(duì)來(lái)自胃機(jī)械感受傳入信號(hào)產(chǎn)生反應(yīng)的胃擴(kuò)張反應(yīng)性神經(jīng)元;胃動(dòng)素可增強(qiáng)大鼠弓狀核內(nèi)胃擴(kuò)張反應(yīng)性神經(jīng)元的電活動(dòng),且胃動(dòng)素誘導(dǎo)的這一興奮作用可被胃動(dòng)素受體拮抗劑GM-109所阻斷;中樞給予胃動(dòng)素后,可引起大鼠胃運(yùn)動(dòng)活動(dòng)增強(qiáng),且這一增強(qiáng)作用可被GM-109阻斷。通過(guò)胃擴(kuò)張這一機(jī)械感受刺激后,弓狀核內(nèi)胃動(dòng)素免疫反應(yīng)性神經(jīng)元數(shù)量增多。研究證實(shí)了弓狀核胃動(dòng)
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