肝癌復發(fā)轉移相關因子Mina和GATA家族轉錄因子的基礎和臨床研究.pdf

1、復旦大學博士學位論文肝癌復發(fā)轉移相關因子Mina和GATA家族轉錄因子的基礎和臨床研究姓名：李藝偉申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：樊嘉20120306博士論文中文摘要GATA6主要是內(nèi)胚層因子，被證實在內(nèi)胚層來源器官的正常或腫瘤組織中存在差異表達。GATA4、GATA5或GATA6由于啟動子甲基化或核漿轉運機制異常導致的異位表達引起的失功能在肺癌、消化道腫瘤和卵巢癌中很常見，它可導致上皮細胞特異性標記物失表達而引起細胞去分化或下

2、調(diào)抑癌基因潛在的靶基因。因此，靶向于GATA家族啟動子甲基化或者核漿轉運機制異常是潛在的抗癌新療法。肝臟屬于內(nèi)胚層起源器官，來自老鼠胚胎內(nèi)胚層細胞的研究提示，在血清白蛋白基因肝臟特異性轉錄增強子區(qū)域存在GATA家族基因特異的結合位點，這種現(xiàn)象持續(xù)于肝臟發(fā)育的整個過程中，是血清白蛋白基因轉錄活性所不可缺少的。目前已有學者報道GATA家族轉錄因子表達于人肝癌細胞系HepRG、HepG2和Hep3B，并且與內(nèi)皮細胞生長因子誘導的核酸切除修復活

3、性及ERCCl的表達有關，而后者是鉑類化療在人類多種腫瘤產(chǎn)生耐藥的重要機制之一。然而，目前沒有任何報道研究GATA家族在肝癌和癌旁組織的表達模式及其對肝癌術后復發(fā)轉移的影響。本課題擬研究Mina和GATA家族轉錄因子在正常肝和肝癌細胞系的表達；通過高通量組織芯片免疫組化技術分析它們在肝癌和配對癌旁組織的表達模式、與患者臨床病理特征的關系及預后價值：借助慢病毒載體、裸鼠皮下瘤和裸鼠原位瘤模型研究Mina對于肝癌生物學特性的影響，試圖尋找預

4、測肝癌患者術后復發(fā)轉移潛在的生物標記物。第一部分、肝癌組織Mina表達下降與患者不良預后相關目的：研究Mina蛋白在不同轉移潛能肝癌細胞系以及肝癌和配對癌旁組織的表達水平，分析其與肝癌細胞系轉移潛能、患者臨床病理特征和預后的關系。方法：我們首先通過蛋白免疫印跡和細胞免疫熒光分析Mina蛋白在不同轉移潛能人肝癌細胞系的表達水平及亞細胞定位，然后通過組織芯片免疫組化技術分析肝癌和癌旁組織Mina蛋白表達水平與患者臨床病理特征和預后的關系。結

5、果：Westemblot結果提示，隨著細胞系轉移潛能增高，Mina蛋白表達水平顯著下降(p=0007)，且發(fā)生胞核向胞漿異位表達，這種異位表達現(xiàn)象經(jīng)細胞免疫熒光進一步證實。組織芯片免疫組化結果提示，Mina蛋白在肝癌組織的表達水平低于配對癌旁組織(陽性率，試驗隊列：癌171／230例，743％VS癌旁229／230例，996％；驗證隊列：癌61／86例，709％vs癌旁85／86例，988％)。在肝癌組織Mina蛋白主要定位于胞漿，而在