川芎嗪對IPF大鼠脆性位點(diǎn)基因WWOX、FHIT影響的研究.pdf

1、目的：
　　本研究采用目前較為通用的博萊霉素氣管內(nèi)注射制作的大鼠肺纖維化模型，分離培養(yǎng)肺纖維化大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞，借助于細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)、免疫組織化學(xué)等實(shí)驗(yàn)方法，研究該細(xì)胞內(nèi)染色體脆性位點(diǎn)基因WWOX、FHIT表達(dá)的改變，為今后開展肺間質(zhì)纖維化的基因治療提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　健康清潔級SD雄性大鼠18只隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組及川芎嗪預(yù)防用藥組。各組動物適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后分別進(jìn)行手術(shù)。假手術(shù)組暴露氣管后即縫

2、合切口，模型組及川芎嗪組則經(jīng)氣管緩慢注入博萊霉素（5mg/kg）后同樣縫合切口。川芎嗪組于術(shù)后第2天開始灌胃給藥，給藥劑量為20mg·kg-1·d-1。實(shí)驗(yàn)期間，大鼠自由飲水和進(jìn)食，并分別于給藥后7d、14d和28d，每組隨機(jī)取2只大鼠處死，提取肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)。對體外培養(yǎng)72h后的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞利用免疫組織化學(xué)方法分析WWOX和FHIT蛋白的表達(dá),RT-PCR技術(shù)檢測WWOX、FHIT基因的改變情況。
　　結(jié)果：<

3、br>　　1、假手術(shù)組大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞內(nèi)WWOX和FHIT蛋白表達(dá)均呈現(xiàn)強(qiáng)陽性。與假手術(shù)組比較，造模7d后模型組大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞內(nèi)WWOX和FHIT蛋白表達(dá)無顯著變化(P＞0.05)。而用藥14、28d后，WWOX和FHIT蛋白表達(dá)則明顯下降(P＜0.05)。川芎嗪組與模型組相比有顯著上調(diào)(P＜0.05)。
　　2、用藥7d后，模型組、川芎嗪組與假手術(shù)組WWOX和FHIT基因mRNA表達(dá)無明顯差異(P＞0.05)，模型組與

4、川芎嗪組相比亦無明顯差異(P＞0.05)；用藥14d后，模型組WWOX和FHIT基因mRNA表達(dá)比假手術(shù)組明顯降低(P＜0.05)，川芎嗪組比模型組則顯著升高(P＜0.05)；用藥28d后的結(jié)果與用藥14d后的結(jié)果相似。
　　結(jié)論：
　　1、在肺間質(zhì)纖維化過程中存在著染色體脆性位點(diǎn)基因WWOX和FHIT的改變。
　　2、川芎嗪可以在一定程度上抑制染色體脆性位點(diǎn)基因WWOX和FHIT的改變，從而可以起到一定的防治肺間質(zhì)纖