羅格列酮對(duì)高脂高糖飲食自發(fā)性高血壓大鼠腎功能的影響.pdf

1、慢性腎損害是高血壓常見(jiàn)的靶器官損害，導(dǎo)致心血管疾病和終末期腎功能障礙的發(fā)病率增高。高脂高糖飲食可導(dǎo)致糖脂代謝紊亂、能量障礙，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，引起血管舒張功能減低，血流量減少；同時(shí)加重炎癥因子、氧化應(yīng)激、脂毒性等多種因素協(xié)同作用，最終導(dǎo)致高血壓性腎損害加重。內(nèi)皮素（enothelin, ET）在高血壓性腎損害病理進(jìn)程中發(fā)揮著重要作用，ET具有縮血管、促增殖、促纖維化、促血小板聚集等多重生物學(xué)效應(yīng)，在血管的縮血管反應(yīng)增強(qiáng)、組

2、織缺血缺氧性硬化等病理進(jìn)程中發(fā)揮重要作用，上述作用是由內(nèi)皮素A型受體（endothelin-1 receptor A, ETRA）所介導(dǎo)的，而內(nèi)皮素B型受體（endothelin-1 receptorB, ETRB）則具有降低ET-1濃度及改善內(nèi)皮依賴性血管舒張反應(yīng)的作用，發(fā)揮腎臟保護(hù)性作用，相關(guān)機(jī)制為ETRB在腎臟的分布以小血管內(nèi)皮為主，介導(dǎo)舒血管因子釋放。
　　研究發(fā)現(xiàn)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome pro

3、liferator activated receptor gamma, PPARγ）人工合成的激動(dòng)劑噻唑烷二酮類，其中羅格列酮（rosiglitazone, ROSI）可以顯著減輕腎損害。研究表明， ROSI通過(guò)作用于靶基因ETRB的5’端-1301-1289的PPARγ反應(yīng)元件（PPARγreaction element, PPRE），在改善血管的舒張功能中發(fā)揮重要作用。而對(duì)于高脂高糖加重原發(fā)性高血壓性腎損害的病理進(jìn)程中，ROSI對(duì)E

4、TRB的調(diào)節(jié)作用及對(duì)腎功能的影響尚不清楚，有待于進(jìn)一步研究。
　　36只6周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneous hypertensive rats, SHR），隨機(jī)分為3組：①治療組（R組, n=12）：高脂高糖飲食（高脂高糖飼料配方為54.6％常規(guī)鼠料、16.9%豬油、14%蔗糖、10.2%酪蛋白、2.1%預(yù)混料和2.2%麥芽糊精，并在每100g飼料中加入雞蛋1個(gè)，花生豆50顆），第8周末到第12周末，給予ROSI（

5、9mg/kg*d）灌胃治療。②對(duì)照組，即高脂高糖飲食組，（H組, n=12），高脂高糖飲食第8周末到第12周末，給予等量蒸餾水灌胃干預(yù)；③空白對(duì)照組，即普通飼料飲食組（C組, n=12），普通飲食飼養(yǎng)；每周上午固定時(shí)間稱量空腹體重、測(cè)量空腹血糖、測(cè)量尾動(dòng)脈血壓；第1周、第8周、第12周初，分別取血、尿樣本，常規(guī)化驗(yàn)血脂、胰島素、白蛋白、肌酐，并且據(jù)公式計(jì)算出并且計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（Homeostasis measure assessme

6、nt insulin resistance, HOMA-IR）、尿白蛋白/肌酐比值（albumin to creatinine ratio, ACR）和肌酐清除率（creatinine clearance rate, Ccr）的變化；用放射免疫法測(cè)量ET-1；第12周末，禁食處死大鼠，提取部分腎組織總 RNA，用于實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)腎組織PPARγ和ET-1及ETRA, ETRB的mRNA的表達(dá)；應(yīng)用4%甲醛中的腎組織制作石蠟切片

7、，用于HE和天狼星-苦味酸染色，定量評(píng)估腎小球硬化指數(shù)（glomerulus sclerosis index, GSI），腎小管間質(zhì)損傷評(píng)分（tubules interstitial Score, TIS）；用于免疫組化，半定量檢測(cè)ETRA和ETRB在腎組織的分布。
　　本研究觀察到，①高脂高糖飲食組大鼠隨著年齡增長(zhǎng)體重平穩(wěn)增長(zhǎng)，到第8周較普通飲食組增高，第12周體重增高顯著（249.18±3.09g vs201.63±3.74g

8、）血壓增高（195.37±3.19 mmHg vs175.49±2.82mmHg）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。血脂、胰島素水平和抵抗指數(shù)、縮血管活性物質(zhì)ET-1均增高：血清胰島素水平明顯增高（79.61±3.16U/L vs54.61±4.33 U/L, P<0.05），HOMA-IR增高（17.90±1.05 vs12.18±1.17）。尿素氮、肌酐、白蛋白水平均增高。ET-1增高(50.47±3.29 pg/ml vs40.4

9、6±3.16 pg/ml, P<0.05)。腎功能指標(biāo)水平變化明顯：Ccr(5.75±0.66ml/min vs12.12±1.16ml/min）降低（P<0.01）， ACR增高(0.80±0.04 mg/μmol vs0.54±0.04 mg/μmol, P<0.05)。腎臟局部ET-1mRNA增高（1.91±0.25 vs0.88±0.32, P<0.01）；ETRA mRNA增高；ETRB mRNA顯著降低（1.38±0.11

10、vs1.96±0.26, P<0.01）；PPARγmRNA降低。HE染色觀察到，兩組都表現(xiàn)為腎小球萎縮，腎小管輕度擴(kuò)張；天狼星苦味酸染色中紅染部分提示腎小管及間質(zhì)損傷明顯，而高脂高糖組損害較對(duì)照組更明顯。腎GSI增高（1.85±0.32 vs0.5±0.16），TIS增高（2.8±0.23 vs1.3±0.16）。②ROSI組的一般情況及血脂水平和縮血管活性物質(zhì)的水平介于普通飲食組和高脂高糖飲食組之間：第12周血壓低于高脂高糖飲食組大

11、鼠血壓（180.71±2.80mmHg vs195.37±3.19mmHg, P<0.05）；體重低于高脂高糖飲食組大鼠體重（285.77±3.00g vs299.77±3.28g, P<0.05）。血清胰島素水平明顯降低（63.36±3.34U/L vs79.61±3.16U/L, P<0.05）， HOMA-IR降低（14.37±0.98 vs17.90±1.05）。血清ET-1降低(45.0±2.72 pg/ml vs50.47±

12、3.29 pg/ml, P<0.05)。 Ccr增高(10.63±1.17ml/min vs5.75±0.66ml/min, P<0.01），ACR降低(0.63±0.03 mg/μmol vs0.80±0.04 mg/μmol, P<0.05)。腎臟局部ET-1、ETRA mRNA降低；PPARγ, ETRB mRNA增高（2.28±0.12 vs1.38±0.11, P<0.01）。HE染色觀察到，三組都表現(xiàn)為腎小球萎縮，腎小管輕度

13、擴(kuò)張；天狼星苦味酸染色中紅染部分提示腎小管及間質(zhì)損傷明顯，ROSI組與高脂高糖飲食組比較，損傷減輕，但與對(duì)照組比較，損傷程度稍嚴(yán)重。腎GSI降低（1.1±0.16 vs1.85±0.32），TIS降低（2.5±0.21 vs2.8±0.23），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　本研究表明，①普通飼料組，體重、血脂、胰島素水平、縮血管活性物質(zhì)隨著年齡變化是增高，同時(shí)其腎功能也相應(yīng)變化，提示原發(fā)性高血壓和年齡都在腎功能減退的進(jìn)

14、程中都發(fā)揮作用。②高脂高糖飲食組，胰島素抵抗指數(shù)/血清胰島素水平、血管活性物質(zhì)ET-1水平比普通飼料組的增高，說(shuō)明高脂高糖飲食加重的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)及ET-1的濃度，導(dǎo)致腎損害進(jìn)一步加重。③治療組，其胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)相對(duì)改善、血管活性物質(zhì)ET-1水平降低，其腎功能指標(biāo)及形態(tài)學(xué)損傷程度降低，延緩了高脂高糖加重高血壓性腎損害的進(jìn)程，但是腎損害程度仍比普通飼料組嚴(yán)重。其相關(guān)機(jī)制可能是，PPARγ被激動(dòng)后，腎組織ETRB的mRNA及蛋白水平均上調(diào)。