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文檔簡介
1、目的:
探討白細胞介素(IL)-17F及IL-17受體C(IL-17RC)對大鼠肺微血管內皮細胞(PMVECs)表達的小窩蛋白1(Cav-1)影響。
方法:
將體外培養(yǎng)的大鼠PMVECs分為時效組以及IL-17RC信號通路干預組;根據(jù)時效組結果:即IL-17F誘導大鼠PMVECs的Cav-1及其磷酸化表達峰值的時間,制定IL-17RC信號通路干預組IL-17F與大鼠PMVECs孵育時間:
?。?)時
2、效組:100 ng/ml的IL-17F刺激0h、0.5h、1.5h、3h、6h、12h、24 h后Western印跡法檢測Cav-1表達以及0min、10min、30 min、60 min、90 min、120min后檢測Cav-1及其磷酸化(p-Cav-1)表達;
?。?)IL-17RC信號通路干預組:siRNA病毒與大鼠PMVECs預孵育3 d后分成2組,第1組給予100 ng/ml的IL-17F刺激60 min后檢測p-C
3、av-1表達,第2組給予100 ng/ml的IL-17F刺激24 h后檢測Cav-1表達,各組分別設對照組、non-siRNA組、IL-17RC-siRNA組、IL-17F組以及non-siRNA+IL-17F組作為參照。
結果:
IL-17F時間依賴性增加大鼠PMVECs表達Cav-1,0 h、0.5 h、1.5 h、3 h、6h、12h、24 h相對表達量分別為(1.139±0.134)、(1.276±0.166
4、)、(1.604±0.080)、(2.115±0.231)、(2.763±0.226)、(3.309±0.493)、(3.963±0.169),1.5 h開始顯著高于0 h,24 h達峰值且顯著高于0h、0.5h、1.5h、3 h、6 h、12 h(均P<0.05);IL-17F時間依賴性增加p-Cav-1表達,0 min、10min、30min、60min、90min、120 min相對表達量分別為(0.540±0.085)、(0.8
5、80±0.084)、(1.437±0.297)、(1.491±0.212)、(1.017±0.210)、(0.882±0.074),10 min開始顯著高于0 min,60 min達峰值且顯著高于0min、10min、30min、90min、120 min(均P<0.05),然后逐漸下降,120 min仍高于0 min。IL-17RC-siRNA可顯著抑制IL-17F誘導的Cav-1和p-Cav-1表達(2.126±0.318比3.89
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