抑殺雜交鱧源舒伯特氣單胞菌的中草藥篩選與應(yīng)用.pdf

1、近年來(lái)，隨著高密度養(yǎng)殖雜交鱧(Channa maculata♀×C.argus♂)技術(shù)的推廣，致使養(yǎng)殖水體水質(zhì)較差，病害頻頻發(fā)生，制約其可持續(xù)健康發(fā)展。其中，舒伯特氣單胞菌（Aeromonas schubertii）所引起的內(nèi)臟類(lèi)結(jié)節(jié)病是鱧科魚(yú)類(lèi)常見(jiàn)疾病之一。中草藥作為在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的藥物，不僅在我國(guó)具有歷史悠久、資源豐富、毒副作用小、無(wú)殘留等優(yōu)勢(shì)，而且具有抗菌、增強(qiáng)免疫等作用。因此，利用中草藥提高魚(yú)體的免疫力，減少病害發(fā)生是維持雜交

2、鱧養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要舉措。
　　試驗(yàn)一選取五倍子、黃柏、烏梅等60味中草藥作為原料，采用水提法，制成濃度為1g/mL的藥液，采用瓊脂擴(kuò)散法和二倍稀釋法，利用來(lái)自患病雜交鱧體內(nèi)分離出的的舒伯特氣單胞菌進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)，以抑菌圈直徑和MIC作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，篩選出抑菌效果較好的中草藥。試驗(yàn)結(jié)果表明，初步篩選出了五倍子、大黃、黃柏、黃連、地榆、丁香、木瓜、訶子、五味子、兒茶、烏梅11味中草藥對(duì)舒伯特氣單胞菌抑菌較好的抑菌效果；通過(guò)二次篩

3、選，確定以初步篩選出的五倍子、大黃、烏梅等11味中草藥進(jìn)行組方試驗(yàn)研究。
　　試驗(yàn)二采用正交t值法進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將初步篩選出的烏梅等11味中草藥進(jìn)行配伍，以瓊脂擴(kuò)散法測(cè)出的抑菌圈直徑為評(píng)價(jià)指標(biāo)，經(jīng)主藥篩選、輔藥交互作用和劑量選擇三個(gè)步驟，篩選出的復(fù)方中草藥由烏梅和木瓜按一定的比例組成；并以急性毒性試驗(yàn)對(duì)該復(fù)方進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)，以雜交鱧為試驗(yàn)對(duì)象，結(jié)果表明，復(fù)方中草藥制劑的半致死濃度 LD50≥8×105mg/L，依據(jù)急性毒性（LD5

4、0）劑量分級(jí)表可判定所選中草藥制劑為無(wú)毒物，屬安全制劑。
　　試驗(yàn)三、四選用初始體重(22.42±0.99) g，體長(zhǎng)(15.45±1.02)cm的雜交鱧為試驗(yàn)對(duì)象，隨機(jī)分為8組，每組30尾，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)。將單方烏梅和復(fù)方中草藥分別以0.5％、1.0%、2.0%劑量加入到基礎(chǔ)飼料中，以基礎(chǔ)飼料和1%木瓜添加量的飼料為對(duì)照，飼喂60d后，分別測(cè)定增重率、特定生長(zhǎng)率、豐滿(mǎn)度、內(nèi)臟比等生長(zhǎng)指標(biāo)、形體指標(biāo)和內(nèi)臟指數(shù)，以研究單方和復(fù)方中草

5、藥對(duì)雜交鱧生長(zhǎng)性能的影響。結(jié)果表明，飼喂試驗(yàn)飼料60d后，隨著復(fù)方添加量的增大，平均末體重、絕對(duì)增重量、增重率和特定生長(zhǎng)率出現(xiàn)緩慢降低的趨勢(shì)，最大值均出現(xiàn)在0.5%復(fù)方添加組，分別比基礎(chǔ)飼料組增加了14.93%、20.92%、22.46%、11.47%。
　　同時(shí)，測(cè)定肝臟、肌肉、血清中SOD、MDA、CAT、ACP和AKP的活性，以研究單方和復(fù)方中草藥對(duì)雜交鱧非特異性免疫功能的影響。結(jié)果表明，各添加組之間形體指數(shù)差異不顯著，而脾

6、臟指數(shù)的最大值出現(xiàn)在2%烏梅添加組，比基礎(chǔ)飼料組增加了47.83%。各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的SOD活性與對(duì)照組相比，均有不同程度的提高，其中，1%烏梅添加量對(duì)肝臟和血清SOD影響最大，2%復(fù)方添加量對(duì)肌肉SOD影響最大；各添加組血清、肝臟和肌肉組織中的MDA含量與對(duì)照組相比，均有不同程度的降低，其中，1%烏梅添加量對(duì)肝臟 MDA影響最大，0.5%復(fù)方、2%烏梅添加組肌肉中的MDA含量最低，2%烏梅添加組血清中MDA含量最低；0.