刺五加（Acanthopanax senticosus）多糖的結(jié)構(gòu)及化學(xué)修飾研究.pdf

1、刺五加(Acanthopanax senticosus)是一種珍貴藥用植物，其中所含的多糖是除苷類外的另一類活性成分，具有良好的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能。本文以刺五加的根為原料，通過多種提取和分離技術(shù)，分別獲得了冷堿提水溶組分(ASC-1)、冷堿提水不溶組分(ASC-2)、熱堿提水溶組分(ASH-1)、熱堿提水不溶組分(ASH-2)、酸提水溶組分(ASA-1)和酸提水不溶組分(ASA-2)；并采用多種化學(xué)分析及現(xiàn)代儀器分析技術(shù)，初步確定了兩

2、個(gè)酸提水溶組分ASA-lP3A和ASA-1P3B的化學(xué)結(jié)構(gòu)；另外，對(duì)冷堿提水不溶組分ASC-2還進(jìn)行了化學(xué)修飾研究，對(duì)提取得到的部分多糖組分進(jìn)行了體內(nèi)、體外生物活性的初步評(píng)價(jià)。 刺五加的根采用乙醇、沸水、冷堿、熱堿、酸提方法依次進(jìn)行了提取，對(duì)提取得到的多糖組分ASC-1、ASH-1、ASA-1分別進(jìn)行了初步的性質(zhì)研究。ASC-1分離純化得到的組分ASA-1P3B經(jīng)檢測(cè)其單糖組成只含木糖，ASH-1分離純化得到的組分ASH-1P3

3、的單糖組成復(fù)雜，含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。對(duì)ASA-1分別采用Q Sepharose Fast．Flow．離子交換層析柱和SephacrylS-100HR凝膠過濾層析柱進(jìn)一步純化，得到了ASA-1P3A和ASA-1P3B兩種具有較高純度的多糖組分。經(jīng)測(cè)定，兩者的重均分子量分別為38287和7228道爾頓，糖含量分別為98.31[％]和97.07[％]，糖醛酸含量分別為29.70[％]和30.80[％]。在對(duì)兩者

4、基本理化性質(zhì)進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上，采用全水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反應(yīng)等多種化學(xué)分析方法和GC、HPLC、IR、UV、1D-NMR、2D-NMR和GC-MS等現(xiàn)代儀器分析技術(shù)對(duì)它們的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了深入研究，結(jié)果表明：(1)ASA-1P3A的主鏈結(jié)構(gòu)以B(1→6)-D-Glc為主，還含有1→3連接的Gal；支鏈中主要含有a(1→4)-D-Glc和1→3連接的Xyl。其中葡萄糖、木糖、半乳糖摩爾比為22.4:5:2:1；(2)ASA-

5、1P3B是以B(1→4)-D-Xyl為主鏈結(jié)構(gòu)，支鏈中含有a(1→4)-D-Glc和1→3連接的Xyl，主鏈或支鏈還含有1→6連接的Glc及少量的Gal。其中木糖、葡萄糖、半乳糖摩爾比為19.4：7.6：l。為改善冷堿提水不溶組分ASC·2的溶解性和提高其藥用價(jià)值，本文分別對(duì)其進(jìn)行了羧甲基化和硫酸酯化修飾，產(chǎn)物經(jīng)純化后得到了羧甲基化衍生物(ASC-2C)和硫酸酯化衍生物(ASC-2S)。經(jīng)測(cè)定，ASC-2C和ASC-2S的重均分子量分別

6、為170kD、110kD；ASC-2C的羧甲基度為0.57，ASC-2S的硫酸基取代度為0.80；兩者的紅外光譜圖中分別出現(xiàn)了羧甲基和硫酸基的特征吸收，證明了衍生方法的成功。另外，本文還對(duì)提取得到的部分多糖組分進(jìn)行了生物活性的初步評(píng)價(jià)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，ASC-1對(duì)小鼠移植性肝癌具有較好的預(yù)防作用。體外篩選實(shí)驗(yàn)表明，ASC-1、ASH-1具有明顯的抑制P-388小鼠白血病細(xì)胞的生物學(xué)活性；ASC-1、ASH-1、ASA-1具有明顯的抑制A-

7、549人肺癌細(xì)胞的生物學(xué)活性，顯示出良好的抗腫瘤應(yīng)用前景。 雖然刺五加多糖的藥理活性研究已有較多報(bào)道，但有關(guān)刺五加多糖，特別是對(duì)刺五加酸提多糖組分的分離純化和結(jié)構(gòu)分析方面的研究報(bào)道尚不多見。本文分別對(duì)刺五加的六種多糖組分進(jìn)行了初步研究，通過對(duì)酸提水溶組分ASA-1P3A和ASA-IP3B較為系統(tǒng)的研究和對(duì)冷堿水不溶組分化學(xué)修飾的研究，可以為刺五加多糖的進(jìn)一步研究與開發(fā)和構(gòu)效關(guān)系的深入研究提供參考，同時(shí)也對(duì)其它中藥植物多糖的研究與