刺五加（Acanthopanax senticosus）多糖的結構及化學修飾研究.pdf

1、刺五加(Acanthopanax senticosus)是一種珍貴藥用植物，其中所含的多糖是除苷類外的另一類活性成分，具有良好的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能。本文以刺五加的根為原料，通過多種提取和分離技術，分別獲得了冷堿提水溶組分(ASC-1)、冷堿提水不溶組分(ASC-2)、熱堿提水溶組分(ASH-1)、熱堿提水不溶組分(ASH-2)、酸提水溶組分(ASA-1)和酸提水不溶組分(ASA-2)；并采用多種化學分析及現(xiàn)代儀器分析技術，初步確定了兩

2、個酸提水溶組分ASA-lP3A和ASA-1P3B的化學結構；另外，對冷堿提水不溶組分ASC-2還進行了化學修飾研究，對提取得到的部分多糖組分進行了體內(nèi)、體外生物活性的初步評價。 刺五加的根采用乙醇、沸水、冷堿、熱堿、酸提方法依次進行了提取，對提取得到的多糖組分ASC-1、ASH-1、ASA-1分別進行了初步的性質研究。ASC-1分離純化得到的組分ASA-1P3B經(jīng)檢測其單糖組成只含木糖，ASH-1分離純化得到的組分ASH-1P3

3、的單糖組成復雜，含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。對ASA-1分別采用Q Sepharose Fast．Flow．離子交換層析柱和SephacrylS-100HR凝膠過濾層析柱進一步純化，得到了ASA-1P3A和ASA-1P3B兩種具有較高純度的多糖組分。經(jīng)測定，兩者的重均分子量分別為38287和7228道爾頓，糖含量分別為98.31[％]和97.07[％]，糖醛酸含量分別為29.70[％]和30.80[％]。在對兩者

4、基本理化性質進行研究的基礎上，采用全水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反應等多種化學分析方法和GC、HPLC、IR、UV、1D-NMR、2D-NMR和GC-MS等現(xiàn)代儀器分析技術對它們的結構進行了深入研究，結果表明：(1)ASA-1P3A的主鏈結構以B(1→6)-D-Glc為主，還含有1→3連接的Gal；支鏈中主要含有a(1→4)-D-Glc和1→3連接的Xyl。其中葡萄糖、木糖、半乳糖摩爾比為22.4:5:2:1；(2)ASA-

5、1P3B是以B(1→4)-D-Xyl為主鏈結構，支鏈中含有a(1→4)-D-Glc和1→3連接的Xyl，主鏈或支鏈還含有1→6連接的Glc及少量的Gal。其中木糖、葡萄糖、半乳糖摩爾比為19.4：7.6：l。為改善冷堿提水不溶組分ASC·2的溶解性和提高其藥用價值，本文分別對其進行了羧甲基化和硫酸酯化修飾，產(chǎn)物經(jīng)純化后得到了羧甲基化衍生物(ASC-2C)和硫酸酯化衍生物(ASC-2S)。經(jīng)測定，ASC-2C和ASC-2S的重均分子量分別

6、為170kD、110kD；ASC-2C的羧甲基度為0.57，ASC-2S的硫酸基取代度為0.80；兩者的紅外光譜圖中分別出現(xiàn)了羧甲基和硫酸基的特征吸收，證明了衍生方法的成功。另外，本文還對提取得到的部分多糖組分進行了生物活性的初步評價。動物實驗表明，ASC-1對小鼠移植性肝癌具有較好的預防作用。體外篩選實驗表明，ASC-1、ASH-1具有明顯的抑制P-388小鼠白血病細胞的生物學活性；ASC-1、ASH-1、ASA-1具有明顯的抑制A-

7、549人肺癌細胞的生物學活性，顯示出良好的抗腫瘤應用前景。 雖然刺五加多糖的藥理活性研究已有較多報道，但有關刺五加多糖，特別是對刺五加酸提多糖組分的分離純化和結構分析方面的研究報道尚不多見。本文分別對刺五加的六種多糖組分進行了初步研究，通過對酸提水溶組分ASA-1P3A和ASA-IP3B較為系統(tǒng)的研究和對冷堿水不溶組分化學修飾的研究，可以為刺五加多糖的進一步研究與開發(fā)和構效關系的深入研究提供參考，同時也對其它中藥植物多糖的研究與