腫瘤細(xì)胞周期限制點(diǎn)破壞機(jī)制的研究.pdf

1、目的 細(xì)胞周期限制點(diǎn)的存在僅在被同步化的良性轉(zhuǎn)化細(xì)胞中證實(shí),而在正常細(xì)胞中是否也存在迄今為止未能得到的證實(shí),其分子基礎(chǔ)也不清楚.該研究采用經(jīng)PHA刺激的正常人外周血淋巴細(xì)胞模型,證實(shí)并定位細(xì)胞周期限制點(diǎn).方法 在經(jīng)PHA刺激的正常人外周血淋巴細(xì)胞模型中,全血清培養(yǎng)基培養(yǎng)到不同時(shí)間后,換成無(wú)血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)到48小時(shí),應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Cyclin E和DNA含量的改變.目的與背景:盡管細(xì)胞周期限制點(diǎn)已被定位于人外周血淋巴細(xì)胞增殖

2、模型中PHA刺激后的12小時(shí)與18小時(shí)之間,但推動(dòng)細(xì)胞通過(guò)限制點(diǎn)的分子基礎(chǔ)并未闡明.該研究采用人類(lèi)外周血淋巴細(xì)胞為研究模型,分析細(xì)胞周期限制點(diǎn)的分子機(jī)制.方法:應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析經(jīng)PHA刺激增殖的淋巴細(xì)胞限制點(diǎn)之前和限制點(diǎn)之后Cyclin E和Cyclin D的表達(dá)情況, 同時(shí)應(yīng)用蛋白質(zhì)分析技術(shù)分析限制點(diǎn)前后pRb磷酸的改變.研究目的和背景:很多科學(xué)家認(rèn)為在正常哺乳動(dòng)物細(xì)胞中存在限制點(diǎn),并為我們的研究所證實(shí),同時(shí)認(rèn)為在腫瘤細(xì)胞中限制點(diǎn)被