牙齦卟啉單胞菌高毒力株W83致病基因篩選.pdf

1、本研究通過抑制消減雜交技術(shù)(SupressionSubtractiveHybridization，SSH)[8]對(duì)比牙齦卟啉單胞菌高毒力株W83與低毒力株標(biāo)準(zhǔn)參考菌ATCC33277的基因差異，建立差異消減文庫，經(jīng)PCR篩選鑒定陽性克隆，進(jìn)而對(duì)部分片段進(jìn)行測序和同源分析。從全基因角度研究牙齦卟啉單胞菌高毒株W83與標(biāo)準(zhǔn)株ATCC33277之間的分子遺傳差異。同時(shí)結(jié)合基因芯片技術(shù)對(duì)臨床患者口腔中牙齦卟啉單胞菌進(jìn)行篩查，可以為牙齦卟啉單胞菌

2、致病基因的篩選提供依據(jù)，為今后牙周病預(yù)防、診治的靶標(biāo)提供理論依據(jù)。 本文通過研究得出如下結(jié)論： 1、本實(shí)驗(yàn)首次應(yīng)用抑制消減雜交技術(shù)構(gòu)建牙齦卟啉單胞菌高毒力株W83與低毒力株ATCC33277的消減文庫，共得到36個(gè)克隆子，平均G+C含量約47.5％，以低毒力株標(biāo)準(zhǔn)參考菌ATCC33277株基因組DNA為被檢者(tester)，高毒力株W83基因組DNA為驅(qū)逐者(driver)進(jìn)行抑制消減雜交得到62個(gè)克隆子，顯示牙齦卟啉

3、單胞菌高毒株W83與標(biāo)準(zhǔn)株ATCC33277之間存在分子遺傳差異。 2、本實(shí)驗(yàn)顯示了抑制消減雜交技術(shù)其技術(shù)上的可行性，同時(shí)也證實(shí)其篩選的差異基因有效、確實(shí)，特異性較高。 3、從全基因角度研究牙齦卟啉單胞菌高毒株W83與標(biāo)準(zhǔn)株ATCC33277之間的分子遺傳差異，可以為牙齦卟啉單胞菌致病基因的篩選提供依據(jù)，為今后牙周病預(yù)防、診治的靶標(biāo)提供理論依據(jù)。 4、本研究首次采用基因芯片技術(shù)以臨床患者口腔中提取出的P.ging