EphB4受體在胰腺癌組織中表達及與腫瘤血管生成的關(guān)系.pdf

1、目的：胰腺癌是消化系統(tǒng)惡性程度最高的腫瘤之一，由于其發(fā)病隱匿、進展迅速、對放化療不敏感，治療困難，其死亡和發(fā)病比為0．99：1。雖然胰腺外科近30年已取得明顯的進步，但目前胰腺癌的治療效果仍不令人滿意，資料顯示，胰腺癌的5年生存率仍低于5．0%，是預(yù)后最差的腫瘤之一。并且隨著人口的老齡化、飲食結(jié)構(gòu)的改變及吸煙人群的增加，近30年來國內(nèi)外胰腺癌的發(fā)病率均呈上升趨勢。 受體酪氨酸激酶（Receptor tyrosine kinase

2、s，RTKs）家族，是目前已知的最大的癌基因家族。Eph受體及其配體ephrins又是RTK基因家族中的最大分支，家族中的EphB4受體和ephrinB2在腫瘤血管方面的研究倍受關(guān)注。EphB4受體通過雙向信號途徑與鄰近的內(nèi)皮細(xì)胞上的配體相互作用，促進了血管內(nèi)皮細(xì)胞的芽生、遷移、增殖和管腔形成。EphB4受體和ephrinB2在動靜脈上特異性分布及相應(yīng)基因敲除后的功能表現(xiàn)，提示他們參與調(diào)控胚胎期血管形成過程中的動靜脈分化，推測早期動靜脈

3、內(nèi)皮細(xì)胞間，EphB4受體和ephrinB2雙向轉(zhuǎn)導(dǎo)信號介導(dǎo)的排斥性導(dǎo)向與血管形成有關(guān)。同時EphB4受體已被證明在結(jié)腸癌；乳腺癌；子宮內(nèi)膜癌；前列腺癌；惡性間皮瘤等中表達。目前作為腫瘤血管研究熱點的EphB4受體與胰腺癌及血管生成之間有如何關(guān)聯(lián)，迄今尚未見相關(guān)報道。本研究采用免疫組化、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）等方法檢測EphB4受體，皆在探討EphB4受體在胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌組織中的表達以及與腫瘤微血管密度（MVD）、臨床病理分

4、期、組織分化程度、侵襲性之間的關(guān)系。 方法：收集大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科2002年～2008年手術(shù)切除的胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌石蠟標(biāo)本27例。4μm連續(xù)切片。采用免疫組化SP法檢測EphB4受體，同時以已知EphB4受體陽性表達的乳腺癌組織作為陽性對照，以正常胰腺組織作為陰性對照。采用免疫組化SP法檢測CD34，計數(shù)腫瘤微血管密度（Micro vessel density，MVD）。 收集大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2007年

5、～2008年手術(shù)切除胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌新鮮標(biāo)本5例（手術(shù)室取得標(biāo)本后立即放于液氮中冷凍，后轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱保存）。采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測EphB4受體mRNA在5例胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌新鮮標(biāo)本中的表達，以已知EphB4受體表達陽性的乳腺癌ZL-1細(xì)胞作為陽性對照，以正常胰腺組織作為陰性對照。 結(jié)果：免疫組化檢測EphB4受體，結(jié)果顯示，試驗組中的陽性表達率為66．7%（18/27），陰性對照組未見表達，兩組有統(tǒng)計學(xué)

6、差異（P<0．05）。EphB4受體主要表達于腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)或胞膜，呈黃色、棕黃色顆粒，其在腫瘤中分布不均或呈小片狀分布，染色強度亦不一致。部分正常胰腺組織和胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌癌組織中，偶見胰島單獨EphB4受體陽性染色，具體原因尚不清楚，有待進一步研究。低分化組中EphB4受體表達與中、高分化組中EphB4受體表達之間比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0．05）。TNM臨床分期中，Ⅲ、Ⅳ期中EphB4受體表達與Ⅰ、Ⅱ期中EphB4受體表達之間比較有統(tǒng)計

7、學(xué)意義（P<0．05）。EphB4受體與年齡、性別、腫瘤部位等之間比較無統(tǒng)計學(xué)差異。 免疫組化檢測CD34，結(jié)果顯示，胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌中富含多種形態(tài)的微血管，較正常胰腺組織，癌組織中微血管數(shù)目明顯增多。27例胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌MVD平均值與正常胰腺組織MVD平均值比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0．05）。MVD與胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌臨床病理因素之間的關(guān)系進行統(tǒng)計學(xué)分析，可見MVD與組織分化有關(guān)，低分化癌MVD與中、高分化癌MVD之間比較有統(tǒng)計學(xué)意義

8、（P<0．05）。Ⅲ、Ⅳ期胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌MVD與Ⅰ、Ⅱ期胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌MVD比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0．05）。胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌MVD與患者年齡、性別、腫瘤部位之間比較無統(tǒng)計學(xué)差異。 采用RT-PCR法檢測5例胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌新鮮標(biāo)本中EphB4受體mRNA，5例標(biāo)本均見表達，陰性對照組未見表達。RT-PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳灰度值與相應(yīng)MVD值之間有正相關(guān)性（P<0．05）。 結(jié)論：EphB4受體在胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌中的高表達與