內(nèi)皮抑素基因治療子宮內(nèi)膜異位癥裸鼠模型異位病灶中Bcl-2、PCNA的表達.pdf

1、目的:本研究利用裸鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥動物模型,通過測定異位病灶中B細胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白和增殖細胞核抗原(PCNA)蛋白的表達變化,探討內(nèi)皮抑素對裸鼠子宮內(nèi)膜異位癥的治療作用。
　　 方法:子宮內(nèi)膜取自在天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦科因子宮肌瘤行全子宮切除術(shù)的6名患者,平均年齡均為45歲。術(shù)后病理證實均為分泌期子宮內(nèi)膜。選擇雌性性成熟裸鼠60只,采用腹腔種植法建立子宮內(nèi)膜異位癥裸鼠模型。將成模的裸鼠模型60只隨機分

2、成3組:內(nèi)皮抑素組(n=20)、空病毒組(n=20)、PBS組(n=20)。給藥方法:二次開腹時內(nèi)皮抑素組異位病灶內(nèi)注射攜帶有內(nèi)皮抑素基因的腺相關(guān)病毒1*109v.g./100μl,空病毒組異位病灶內(nèi)注射不攜帶內(nèi)皮抑素基因的腺相關(guān)病毒1*109v.g./100μl,PBS組異位病灶內(nèi)注射PBS100μl。于第二次開腹后2周處死各組裸鼠,留取病灶,觀察各組異位病灶中腺體數(shù)目的變化,及應(yīng)用免疫組化方法測定中Bcl-2、PCNA的表達變化。<

3、br>　　 結(jié)果:(1)子宮內(nèi)膜異位癥裸鼠模型成功建立,成功率100％。(2)用藥前,3組間腺體數(shù)目比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),用藥2周后,光鏡下,3組中異位的子宮內(nèi)膜腺體均萎縮,結(jié)構(gòu)破壞,數(shù)目減少,間質(zhì)內(nèi)有不同程度的壞死,血管減少。但是內(nèi)皮抑素組的腺體萎縮及血管減少較空病毒組和PBS組明顯,空病毒組和PBS組的鏡下表現(xiàn)相似。(3)Bcl-2蛋白的陽性反應(yīng)物為棕黃色顆粒,主要定位于子宮內(nèi)膜腺上皮細胞的胞漿中,偶有細胞核的表達,內(nèi)

4、膜血管幾乎不表達；PCNA蛋白的陽性反應(yīng)物為棕黃色顆粒,主要定位于子宮內(nèi)膜腺上皮細胞的胞核中,偶有細胞漿的表達。(4)給予治療后,Bcl-2和PCNA均在腺體中表達。Bcl-2在內(nèi)皮抑素組治療后的陽性表達率明顯低于治療前,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；空病毒組和PBS組治療前后的陽性表達率比較,其差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；在內(nèi)皮抑素組治療后的陽性表達率明顯低于在空病毒組及PBS組治療后的陽性表達率,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(

5、P<0.05)；空病毒組和PBS組治療后的陽性表達率比較,其差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。PCNA在內(nèi)皮抑素組治療后的陽性表達率明顯低于治療前,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；空病毒組和PBS組治療前后的陽性表達率比較,其差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；在內(nèi)皮抑素組治療后的陽性表達率明顯低于在空病毒組及PBS組治療后的陽性表達率,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；空病毒組和PBS組治療后的陽性表達率比較,其差異無統(tǒng)計學(xué)意