DNA定量分析技術(shù)預(yù)測OPMDs癌變風(fēng)險的研究.pdf

1、研究背景:
　　口腔黏膜潛在惡性疾病(Oral potentially malignant disorders，OPMDs)是指相對于其它口腔黏膜，癌變風(fēng)險明顯增加的一類病損，包括口腔白斑、口腔扁平苔蘚、口腔紅斑、口腔黏膜下纖維性變等等，是口腔鱗癌最重要的來源之一。目前，組織病理學(xué)仍然是評價OPMDs癌變風(fēng)險的金標(biāo)準(zhǔn)，但活體組織檢查有創(chuàng)傷性、過程耗時、患者依從性差等缺陷。因此，尋找一種無創(chuàng)、簡便、快速、患者易于接受的方法來預(yù)測高危

2、OPMDs的癌變風(fēng)險很有必要。DNA定量分析技術(shù)(DNA content analysis)是通過對細(xì)胞核內(nèi)的DNA含量或染色體倍數(shù)的測定來判斷細(xì)胞的生理狀態(tài)和病理改變的一種方法，是病理學(xué)由傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)描述向定量分析發(fā)展的產(chǎn)物，通常應(yīng)用DNA指數(shù)(DNA index，DI)表示DNA的含量，可以間接反映染色體數(shù)目。DNA含量異常（異倍體）往往是組織細(xì)胞癌變的特異性指征，因此可作為癌變的一項標(biāo)記物。DNA定量分析技術(shù)是否可以應(yīng)用于評價口腔

3、黏膜潛在惡性疾病患者的癌變風(fēng)險？其臨床價值如何？這就是本研究的目的和意義所在。
　　研究方法:
　　1.檢測口腔黏膜潛在惡性疾病患者的DNA含量并采用受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic curve，ROC曲線）統(tǒng)計得出應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)診斷口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的最適DI值。
　　2.應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)檢測不同OPMDs病種患者的DNA含量并分析其

4、與臨床病理特征、細(xì)胞學(xué)改變之間的關(guān)系。明確該技術(shù)應(yīng)用于評價口腔黏膜潛在惡性疾病不同病種患者癌變風(fēng)險的臨床價值。
　　3.選擇口腔白斑、口腔扁平苔蘚（網(wǎng)紋型）、口腔黏膜下纖維性變患者，分別應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)檢測患者的DNA含量并分析其與臨床病理特征、細(xì)胞學(xué)改變之間的關(guān)系。
　　研究結(jié)果:
　　1.采用受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic curve，ROC曲線）統(tǒng)計得

5、出應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)診斷口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的最適DI值為DI≥2.3的細(xì)胞數(shù)目至少為2個，以此可以作為應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)評價口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考值，并可根據(jù)該診斷標(biāo)準(zhǔn)參考值評價癌變風(fēng)險。
　　2.應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)檢測不同OPMDs病種患者的DNA含量并分析其與臨床病理特征、細(xì)胞學(xué)改變之間關(guān)系的結(jié)果如下:
　　2.1.關(guān)于口腔白斑的Logistic回歸分析顯示:舌部病損

6、和根據(jù)白斑的分期體系屬于Ⅲ、Ⅳ期的自斑患者是DNA含量異常的風(fēng)險因素，細(xì)胞核DNA含量改變與病理細(xì)胞學(xué)改變呈正相關(guān)。此外，細(xì)胞核形態(tài)參數(shù)比較分析顯示:高級別異常增生組的白斑DNA指數(shù)值（DI值）、核面積、平均半徑較低級別組高，而球形度、平均強度、熵、分形維數(shù)值較低級別組低。
　　2.2.關(guān)于口腔扁平苔蘚（網(wǎng)紋型）的Logistic回歸分析顯示:性別、年齡、病損部位、飲食習(xí)慣、吸煙、飲酒、上皮異常增生程度等因素都不是口腔扁平苔蘚（網(wǎng)

7、紋型）患者DNA含量異常的風(fēng)險因素，而細(xì)胞核DNA含量改變與病理細(xì)胞學(xué)改變呈正相關(guān)。
　　2.3.關(guān)于口腔黏膜下纖維性變的Logistic回歸分析顯示:性別、年齡、病損部位、飲食習(xí)慣、吸煙、飲酒、上皮異常增生程度等因素都不是口腔黏膜下纖維性變患者DNA含量異常的風(fēng)險因素，而細(xì)胞核DNA含量改變與病理細(xì)胞學(xué)改變呈正相關(guān)。
　　3.應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)檢測不同病種OPMDs患者的DNA含量，預(yù)測口腔白斑的高級別異常增生病損的敏

8、感性為67.74％，特異性為66.67％，陽性預(yù)測值為61.76％，陰性預(yù)測值為72.22％，假陽性率為38.24％，假陰性率為27.78％;預(yù)測網(wǎng)紋型口腔扁平苔蘚的高級別異常增生病損的敏感性為33.3％，特異性86.3％，陽性預(yù)測值為4.3％，陰性預(yù)測值為98.6％，假陽性率為95.7％，假陰性率為1.4％;預(yù)測口腔黏膜下纖維性變的異常增生病損的敏感性為14.3％，特異性為90.5％，陽性預(yù)測值為33.3％，陰性預(yù)測值為76.0％，假

9、陽性率為66.7％，假陰性率為24.0％。
　　結(jié)論:
　　1.應(yīng)用DNA定量分析技術(shù)預(yù)測口腔黏膜潛在惡性疾病患者的癌變風(fēng)險，得出針對口腔黏膜高級別異常增生/原位癌病損的陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)參考值為DI≥2.3的細(xì)胞數(shù)目至少2個，并可根據(jù)該陽性評價標(biāo)準(zhǔn)預(yù)測癌變風(fēng)險。
　　2.DNA定量分析技術(shù)在不同的口腔黏膜潛在惡性疾病的DNA含量異常的危險影響因素分析中有所不同，提示在臨床檢查中應(yīng)當(dāng)注意口腔黏膜潛在惡性疾病的DNA含量異常的

10、危險影響因素在不同病種間的差別，從而采取不同的預(yù)防重點。
　　3.與病理結(jié)果比較，DNA定量分析預(yù)測上皮異常增生病損的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值等等在不同的口腔黏膜潛在惡性疾病中有差別:預(yù)測口腔白斑的敏感性(67.74％)和特異性(66.67％)適中，陽性預(yù)測值(61.76％)和陰性預(yù)測值(72.22％)較高，因而適合在臨床上作為篩選口腔白斑患者的輔助手段。采用該技術(shù)判別網(wǎng)紋型OLP和OSF癌變的敏感性較低（分別為33

11、.3％和14.3％），但特異性較高（分別為86.3％和90.5％），因而可作為發(fā)現(xiàn)網(wǎng)紋型OLP和OSF患者癌變傾向的重要警示。
　　4.無論在何種口腔黏膜潛在惡性疾?。谇话装?、口腔扁平苔蘚、口腔黏膜下纖維性變）中，無論是否與“高危或低?！毕嚓P(guān)，DNA定量分析技術(shù)反映的細(xì)胞核DNA含量改變都與病理細(xì)胞學(xué)改變呈高度正相關(guān)，因為DNA定量分析技術(shù)檢測到的改變往往比病理細(xì)胞學(xué)改變出現(xiàn)的時間早，提示DNA定量分析技術(shù)不僅可以作為傳統(tǒng)病理學(xué)