中國男性外周血淋巴細(xì)胞年齡效應(yīng)的細(xì)胞遺傳學(xué)研究.pdf

1、衰老是一種遺傳因素和外界環(huán)境共同影響的，由在細(xì)胞水平上發(fā)生的變化逐步積累并最終表現(xiàn)在組織器官水平上的現(xiàn)象。在衰老的過程中，有許多因素會誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的損傷(如基因突變、端粒縮短、細(xì)胞內(nèi)調(diào)控機制失調(diào)等)。在這些與衰老有關(guān)的遺傳物質(zhì)的損傷中，最為明顯的表現(xiàn)就是在細(xì)胞分裂過程中染色體分離異常以及非整倍體細(xì)胞的年齡效應(yīng)。 在本次研究中，我們采用cytokinesis-blockmethod分別從染色體分離異常的角度以及非整倍體細(xì)胞命

2、運的角度探討中國男性外周血淋巴細(xì)胞中的年齡效應(yīng)： 1.運用cytokinesis-blockmethod，我們首次研究并報道了在中國男性的外周血淋巴細(xì)胞中染色體分離異常的年齡效應(yīng)。本文收集了14名老年(60-70歲之間)和10名青年(22-26歲之間)中國男性的外周血，從中分離得到淋巴細(xì)胞并進行培養(yǎng)，以松胞素B阻滯細(xì)胞質(zhì)分裂而獲得雙核細(xì)胞，利用人X、Y和2號染色體特異的著絲粒探針進行熒光原位雜交，以檢測X和Y染色體的分離異常。發(fā)

3、現(xiàn)：老年人淋巴細(xì)胞中，X染色體(老年組9.2±3.2‰，青年組1.1±0.9‰，P<0.001)和Y染色體(老年組2.5±1.9％，年輕組0.2±0.3‰，P<0.001)丟失的頻率較青年人顯著升高；X染色體(老年組16.5±3.4‰，年輕組3.5±1.1‰，P<0.001)和Y染色體(老年組7.2±2.6‰，年輕組2.4±1.3‰，P<0.001)不分離的頻率也隨著年齡增加而顯著升高；在老年人和青年人的淋巴細(xì)胞中，無論X染色體還是Y染

4、色體，其染色體不分離的頻率均顯著高于丟失的頻率；觀察到的多種染色體分離異常同時發(fā)生的頻率也顯著高于相應(yīng)的預(yù)期頻率。這些結(jié)果表明，年齡顯著影響中國男性淋巴細(xì)胞中X和Y染色體的正常分離；與染色體丟失相比，染色體不分離是中國男性性染色體分離異常的是主要類型；細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)染色體精確分離的機制出現(xiàn)異?？赡軙瑫r引起X和Y染色體的丟失及不分離。 2.我們分析了發(fā)生染色體分離異常的有絲分裂理論上應(yīng)產(chǎn)生的子細(xì)胞，在理論上應(yīng)產(chǎn)生的子細(xì)胞群體中Chr

5、X-細(xì)胞在淋巴細(xì)胞群體中所占比例值為25.7‰，而我們在體內(nèi)的外周血淋巴細(xì)胞群體中實際并未觀察到ChrX-細(xì)胞，從這一結(jié)果中，我們推測X染色體的缺失對男性淋巴細(xì)胞的存活有極大的影響。此外，通過比較進入分裂形成雙核的非整倍體淋巴細(xì)胞以及未進入分裂的單核非整倍體淋巴細(xì)胞，我們探討了不同染色體的缺失或者獲得對淋巴細(xì)胞分裂能力的影響。結(jié)果表明，在老年人的幾種非整倍體外周血淋巴細(xì)胞中，Y染色體缺失的淋巴細(xì)胞(ChrY-)的分裂能力最強(P<0.0

6、01，x2-test)，與之不同的是，在年輕人的非整倍體外周血淋巴細(xì)胞中，Y染色體缺失的淋巴細(xì)胞(ChrY-)的分裂能力與X染色體獲得的淋巴細(xì)胞(ChrX+)相似(P=0.46，X2-test)，而Y染色體獲得的淋巴細(xì)胞(ChrY+)的分裂能力最弱(P<0.001，x2-test)。這一結(jié)果說明了在老年人和青年人中Y染色體對細(xì)胞分裂能力的不同影響，說明了Y染色體隨年齡增長對細(xì)胞的功能和重要性的變化。綜上所述，不同染色體的缺失或者獲得對細(xì)