KNSL4基因單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf

1、摘要研究背景:乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率逐年上升。它的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)成為患者死亡的主要原因，也是臨床治療的難題。乳腺癌轉(zhuǎn)移涉及眾多基因調(diào)控，是復(fù)雜的生物學(xué)過程。研究表明，腫瘤相關(guān)基因的某些突變和多態(tài)性位點(diǎn)可用作評估腫瘤進(jìn)展和預(yù)后的指標(biāo)。 鑒于此，實(shí)驗(yàn)室 前期對乳腺癌進(jìn)行了 轉(zhuǎn)移相關(guān)基因 篩選， 發(fā)現(xiàn) K N S L 4 ( K i n e s i n - l i k e 4 ) 基因 在乳腺轉(zhuǎn)移 癌中較原發(fā)癌表達(dá)下調(diào)，是

2、 潛在的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因。由 于單核昔酸多 態(tài)性 ( S i n g l e N u c l e o t i d e P o l y m o r p h i s m , S N P ) 是 可 能 影 響 基 因 表 達(dá)的 重 要因 素 之 一 ， 本 研 究以 其基因啟 動子區(qū)域、外顯子區(qū)可產(chǎn)生編碼蛋白 氨基酸改變的4 個 S N P 位點(diǎn)為研究 對象， 檢測其基因型是否與K N S L 4 表達(dá)下調(diào)有關(guān)。工作 日的: 探討位于K

3、 N S L 4基因的啟動子區(qū)域和可使其產(chǎn)生編碼蛋白氨基酸改變的4 個S N P 位點(diǎn)基因型情況與K N S L 4 基因在乳腺轉(zhuǎn)移癌中表達(dá)下調(diào)的相關(guān)性。研究方法和標(biāo)本: 采用T a g M a n 等 位基因鑒別分析技術(shù)與基因 測序結(jié)合的方法，以1 0 8 例乳腺癌病 例、 7 個不同生 物學(xué) 行為的乳 腺癌細(xì)胞系為研究對象，以9 6 位正常人為對照， 對以 上4 個S N P 位點(diǎn) — 4 7 3 G / T , 9 6 7 7

4、C / T , 1 0 3 6 3 A / G和1 4 8 3 6 A / G進(jìn)行檢測， 分析其與K N S L 4 表達(dá)下調(diào)的關(guān)系。 乳腺癌患者基因組D N A提取自 腫瘤組織、癌旁正常組織， 對照組D N A提取自 外周血， 7 個乳腺癌細(xì)胞系分別為 E R - / V I M+ , MD A - MB - 2 3 1 , MD A - MB - 4 3 5 S , E R - / V I M- , S K - B r -

5、 3 ,E R 十 / V I M- , MC F - 7 , T 4 7 D , Z R - 7 5 - 1 和 MD A - MB - 4 5 3 0研 究 結(jié) 果: 乳 腺 癌組 ， 1 0 3 6 3 G等 位 基 因 與L N ( + ) , E R( 一 ) 和H e r - 2( + )存在正相關(guān) ( P0 . 0 5 ) . T h e f r e q u e n c y o f 4 7 3 T a