黃芪復(fù)方治療重癥肌無(wú)力的臨床與實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、重癥肌無(wú)力（MG）是一種主要累及神經(jīng)肌肉接頭處（NMJ）突觸后膜（postsynaptic）上乙酰膽堿受體（AchR），主要由乙酰膽堿受體抗體（AchRab）介導(dǎo)、細(xì)胞免疫（CMI）依賴性、補(bǔ)體（complement）參與的自身免疫性疾?。╝utoimmune disease）。其特點(diǎn)包括：1．臨床上表現(xiàn)為活動(dòng)后加重、休息后減輕、朝輕暮重的骨骼肌無(wú)力。2．電生理上表現(xiàn)為低頻重復(fù)電刺激波幅遞減，微小終板電位降低、單纖維肌電圖上顫抖增寬、甚

2、至阻滯。3．藥理學(xué)上表現(xiàn)為膽堿酯酶抑制劑治療有效、對(duì)箭毒類藥物的過(guò)度敏感性。4．免疫學(xué)上表現(xiàn)為血清乙酰膽堿受體抗體增高。5．免疫病理學(xué)上表現(xiàn)為神經(jīng)肌肉接頭處突觸后膜的皺褶減少，變平坦，突觸后膜上乙酰膽堿受體減少。重癥肌無(wú)力是一種世界性疑難病，目前西醫(yī)治療方法均有不同程度的副作用，因此，發(fā)掘減少西藥副作用且療效確切的中藥成為當(dāng)務(wù)之急。黃芪復(fù)方顆粒劑是導(dǎo)師張靜生教授在脾腎學(xué)說(shuō)指導(dǎo)下研制成功的治療重癥肌無(wú)力的純中藥制劑，在臨床和實(shí)驗(yàn)研究中均取

3、得了明顯療效。
　　 目的：觀察黃芪復(fù)方治療重癥肌無(wú)力的臨床療效；觀察黃芪復(fù)方對(duì)重癥肌無(wú)力患者外周血淋巴細(xì)胞亞群；輔助性淋巴細(xì)胞亞群Th1/Th2、抑制性淋巴細(xì)胞亞群Tc1/Tc2；細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4及TNF-α水平；免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、補(bǔ)體C3、C4和AChRAb水平的影響，從細(xì)胞水平揭示中藥黃芪復(fù)方治療MG的免疫機(jī)理。
　　 方法：
　　 1．根據(jù)診治先后，將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的重癥肌無(wú)力患

4、者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，兩組各30例。治療組服用黃芪復(fù)方顆粒劑和強(qiáng)的松：對(duì)照組服用強(qiáng)的松和模擬劑。90天為一療程。觀察治療前后的臨床療效積分和中醫(yī)證候積分變化。
　　 2．應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)治療前后的重癥肌無(wú)力患者外周血淋巴細(xì)胞亞群分布的變化情況。
　　 3．應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)黃芪復(fù)方顆粒劑及模擬劑和強(qiáng)的松治療前后重癥肌無(wú)力患者外周血Th1、Tc1、Th2、Tc2細(xì)胞的變化情況。
　　 4．采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

5、技術(shù)檢測(cè)重癥肌無(wú)力患者治療前后外周血血清細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4及TNF-α水平的變化。
　　 5．采用免疫比濁及酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)重癥肌無(wú)力患者治療前后外周血IgG、IgA、IgM、C3、C4、AChRAb水平的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1．臨床研究結(jié)果顯示：黃芪復(fù)方對(duì)重癥肌無(wú)力具有明顯療效。從臨床療效積分變化統(tǒng)計(jì)：治療組顯效率70.0％，對(duì)照組顯效率56.7％，二者相比較，治療組療效優(yōu)于對(duì)照組，具

6、有顯著性差異；從中醫(yī)證候積分變化統(tǒng)計(jì)：治療組有效率73.33％，對(duì)照組有效率僅為56.67％，兩組中醫(yī)證候改善情況有顯著差異，提示治療組在中醫(yī)證候改善方面明顯優(yōu)于對(duì)照組。研究還發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組治療后出現(xiàn)輕度肝功能異常、空腹血糖增高、向心性肥胖等副作用；而中藥黃芪復(fù)方具有確切的治療作用，且未發(fā)現(xiàn)任何毒副作用，明顯優(yōu)于對(duì)照組。
　　 2．兩組患者治療前外周血CD4+細(xì)胞及CD4+/CD8+比值均明顯高于健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD8

7、+細(xì)胞、NK細(xì)胞（CD16+/56+）水平較健康組顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩組CD3+、總B細(xì)胞（CD19+）比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。治療后，兩組CD3+細(xì)胞無(wú)明顯變化，而CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+比值及總B細(xì)胞（CD19+）與治療前比較均有明顯下降，CD8+及NK細(xì)胞（CD16+/56+）均明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與對(duì)照組治療后相比較治療組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD19+、CD16+/56+均有顯著差異。<

8、br>　　 3．與健康組相比較，兩MG組外周血中Th1、Th2、Tc1和Tc2細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Th1/Th2、Tc1/Tc2比值同健康組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后，治療組Th1型、Tc1型細(xì)胞明顯減少，與對(duì)照組治療后比較有顯著性差異。
　　 4．兩MG組外周血IFN-γ、IL-4、TNF-α水平均明顯高于健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與治療前相比較，兩MG組經(jīng)治療后IFN-γ、IL-4、TNF-α水平均顯

9、著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組治療后比較，治療組各項(xiàng)指標(biāo)下降顯著，與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5．與健康組比較，兩MG組AchRab水平顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩MG組IgA、IgM水平均顯著低于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩MG組C3、C4水平顯著降低，與健康組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)治療后，治療組補(bǔ)體C3、C4水平與治療前相比顯著增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組AchRab水平與治療前比較有明顯下降，差異有

10、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組補(bǔ)體C3、C4及AchRab水平與對(duì)照組治療后比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1．黃芪復(fù)方+基礎(chǔ)西藥能明顯改善重癥肌無(wú)力患者的臨床癥狀和中醫(yī)證候，在中醫(yī)證候改善方面明顯優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用強(qiáng)的松治療，而且無(wú)任何毒副作用。
　　 2．黃芪復(fù)方可能通過(guò)抑制Th細(xì)胞增殖，促進(jìn)T細(xì)胞活化，降低CD4+/CD8+，使重癥肌無(wú)力患者體內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群比例重新分布，糾正重癥肌無(wú)力異常的免疫應(yīng)答過(guò)程，最終

11、抑制B細(xì)胞產(chǎn)生以乙酰膽堿受體抗體為主的自身抗體。
　　 3．黃芪復(fù)方通過(guò)抑制MG患者Th1型細(xì)胞和Tc1型細(xì)胞的分化，減少Th1/ Tc1型細(xì)胞因子如IFN-γ的分泌而起到抗炎和改變病程的作用。
　　 4．經(jīng)過(guò)黃芪復(fù)方治療后，血清中IFN-γ、IL-4、TNF-α均有不同程度的降低，可以反映中藥治療MG的免疫效應(yīng)。在免疫抑制方面，黃芪復(fù)方+免疫抑制劑強(qiáng)的松治療組比單用免疫抑制劑強(qiáng)的松效果明顯，說(shuō)明黃芪復(fù)方對(duì)調(diào)節(jié)免疫功能是