X染色體失活偏移及IL-21多態(tài)性與甲狀腺乳頭狀癌的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、女性體細(xì)胞組織是由來自父系、母系兩類細(xì)胞構(gòu)成的嵌合體，部分細(xì)胞中父本X染色體有活性，其余細(xì)胞中母本X染色體有活性。理論上，有活性的父本X染色體連鎖基因與有活性的母本X染色體連鎖基因的數(shù)量應(yīng)為1∶1，如這一比率發(fā)生顯著偏差，稱為X染色體失活偏移(skewed X-chromosomeinactivation，SXCI)。SXCI的發(fā)生可能是隨機(jī)的偶然事件，可能是遺傳使然，也可能是生長發(fā)育過程中二次選擇的結(jié)果。業(yè)已證實(shí)，SXCI的發(fā)生率隨著

2、年齡的增大而升高，血細(xì)胞SXCI與女性卵巢癌、乳腺癌、食管癌以及一些自身免疫性疾病等相關(guān)。
　　甲狀腺乳頭狀癌逐年高發(fā)，女性發(fā)病率明顯高于男性，但是，女性甲狀腺乳頭狀癌的預(yù)后普遍優(yōu)于男性患者，迄今為止，甲狀腺乳頭狀癌的確切病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確，可能與雌激素水平、放射線接觸、吸煙飲酒、碘攝入過多以及遺傳等多種因素有關(guān)。治療以外科手術(shù)為主，但是，手術(shù)的范圍以及干預(yù)的時(shí)機(jī)目前爭議很大，近數(shù)十年來，甲狀腺癌的總體死亡率一直保持在0.5/

3、10萬左右。
　　本課題擬在明確甲狀腺乳頭狀癌組織中與外周血SXCI的相關(guān)性基礎(chǔ)上，通過大樣本檢測女性甲狀腺乳頭狀癌患者血細(xì)胞SXCI發(fā)生情況，分析SXCI與女性甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生的關(guān)系，并進(jìn)一步探討SXCI與甲狀腺微小癌、甲狀腺淋巴轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系，為甲狀腺癌的病因?qū)W研究及個(gè)體化治療提供線索。
　　本研究采集了1180例女性甲狀腺乳頭狀癌患者的外周血標(biāo)本，49例女性甲狀腺乳頭狀癌組織標(biāo)本以及1000例健康女性的外周血標(biāo)本，提

4、取基因組DNA，經(jīng)HpaⅡ酶消化后，擴(kuò)增AR基因，產(chǎn)物經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，銀染顯示結(jié)果，比較HpaⅡ酶消化前后AR基因擴(kuò)增產(chǎn)物的強(qiáng)度差異，計(jì)算其校正比值(CR)。
　　結(jié)果:(1)48對甲狀腺乳頭狀癌組織標(biāo)本和外周血標(biāo)本中，二者的XCI值高度相關(guān)(n=48，r=0.57，P＜0.01)。(2)以CR≥3作為SXCI的判斷標(biāo)準(zhǔn)，女性甲狀腺乳頭狀癌的SXCI的總發(fā)生率明顯高于健康女性，分別為22.0％(243/1107)和13.

5、1％(118/902)(P=0.002);以CR≥10作為SXCI的判斷標(biāo)準(zhǔn)，SXCI的發(fā)生率分別為6.4％(71/1107)和4.8％(43/902)(P=0.19)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)無論以CR≥3或者CR≥10為標(biāo)準(zhǔn)，年齡≤45歲的女性甲狀腺乳頭狀癌患者的SXCI的發(fā)生率均明顯高于相應(yīng)的健康對照組，而在年齡＞45歲年齡段，女性甲狀腺乳頭狀甲狀腺癌患者的SXCI的發(fā)生率均與相應(yīng)的健康對照組無顯著性差異。(4)以CR≥3為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)

6、，女性甲狀腺微小乳頭狀癌SXCI的發(fā)生率為31.8％，明顯高于女性甲狀腺非微小乳頭狀癌的19.6％，以CR≥10為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)二者無顯著差異。(5)無論以CR≥3或者CR≥10為標(biāo)準(zhǔn)，女性甲狀腺乳頭狀癌伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組SXCI的發(fā)生率與不伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間均無顯著性差異。
　　結(jié)論:(1)年輕女性（年齡≤45歲）甲狀腺乳頭狀癌外周血細(xì)胞的SXCI的發(fā)生率明顯高于健康女性，但是隨著年齡的增大（＞45歲），SXCI的發(fā)生率與健康女性無明顯

7、差異，這提示，SXCI與年輕女性甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生相關(guān)，發(fā)生SXCI的年輕女性患甲狀腺乳頭狀癌的風(fēng)險(xiǎn)可能增高。(2)女性甲狀腺微小乳頭狀癌SXCI的發(fā)生率明顯高于女性甲狀腺非微小乳頭狀癌，但二者的發(fā)生率均高于同年齡匹配的健康女性，這說明，總體而言，SXCI的發(fā)生可能將導(dǎo)致甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生，但這些女性患者更多將形成甲狀腺微小乳頭狀癌。(3)發(fā)生SXCI與甲狀腺女性甲狀腺乳頭狀癌是否形成頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能無關(guān)。
　　IL-21主要

8、由活化的CD4+T細(xì)胞、NK T細(xì)胞和Th17細(xì)胞產(chǎn)生，其受體屬Ⅰ型細(xì)胞因子受體家族成員之一，具有共同的γ鏈?zhǔn)荏w，即γc。IL-21對機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫均具有廣泛的調(diào)節(jié)作用。幾項(xiàng)研究已經(jīng)表明，IL-21基因的多態(tài)性與許多惡性腫瘤相關(guān)聯(lián)。我們采用病例對照分析進(jìn)行評估IL-21基因五個(gè)單核苷酸多態(tài)性(rs12508721C＞T,rs907715G＞,rs13143866G＞,rs2221903A＞G和rs4833837A＞G)與甲狀腺

9、乳頭狀癌患病風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)。此外，對于rs12508721C＞T基因型，我們更進(jìn)一步進(jìn)行了一些探索。結(jié)果:攜帶IL-21 rs12508721 CT基因型的甲狀腺乳頭狀癌易感性明顯降低(OR=0.72;95％CI=0.57-0.94)(P=0.01)，攜帶IL-21rs12508721TT基因型甲狀腺乳頭狀癌易感性降低更顯著(OR=0.56;95％CI=0.41-0.87)(P=0.0006)，其他4種基因型在健康對照組與甲狀腺乳頭狀癌