通過(guò)基因修飾的抗原特異性B淋巴細(xì)胞的體內(nèi)擴(kuò)增提高外源治療基因的表達(dá)水平.pdf

1、基因治療是指應(yīng)用基因工程和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)，將一些具有治療價(jià)值的外源基因?qū)塍w內(nèi)，通過(guò)修復(fù)或補(bǔ)充失去正常功能的某些基因來(lái)達(dá)到治療疾病的目的。盡管有關(guān)基因治療的基礎(chǔ)研究已經(jīng)歷時(shí)多年并廣泛展開，少數(shù)基因治療藥物還獲準(zhǔn)在臨床使用，但是因?yàn)榘踩院陀行缘膯?wèn)題，當(dāng)前基因治療研究的進(jìn)展緩慢。因此安全和有效是當(dāng)今基因治療中共同關(guān)注的兩大主題。必須在保證安全性的基礎(chǔ)上盡可能的提高基因治療的效率。影響基因治療安全和效率的兩個(gè)主要因素是基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)和靶細(xì)胞

2、。目前應(yīng)用于基因治療的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)主要有病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)。病毒載體具有高效的優(yōu)點(diǎn)，因此基因治療研究廣為采用。但是由于安全性問(wèn)題，目前其應(yīng)用已受到了很大限制。非病毒載體盡管安全性較高，但其效率較低，離實(shí)際應(yīng)用的要求相差甚遠(yuǎn)。目前研究提高非病毒載體的效率來(lái)提高基因治療的效率進(jìn)展緩慢。提高基因治療效率的另一個(gè)可能途徑是擴(kuò)增用于基因治療的靶細(xì)胞，使表達(dá)外源治療基因的細(xì)胞數(shù)量增加，從而使外源治療基因表達(dá)水平提高，最終提高基因治療的效率

3、。造血干細(xì)胞和記憶性的淋巴細(xì)胞都是長(zhǎng)壽命的細(xì)胞，有利于外源治療基因轉(zhuǎn)入后在體內(nèi)的長(zhǎng)期表達(dá)，因而是目前基因治療中較為常用的靶細(xì)胞。但是，造血干細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的體外長(zhǎng)期培養(yǎng)和擴(kuò)增非常困難，使這些靶細(xì)胞的應(yīng)用受到了很大的限制。本研究利用B淋巴細(xì)胞受特異性抗原刺激后可在體內(nèi)發(fā)生克隆增生并分化為記憶性B淋巴細(xì)胞的特性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，使B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)基因修飾，可以同時(shí)表達(dá)抗原特異性受體和外源治療基因，初步實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞水平和實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)外源基因修飾的B