Epstein-Barr病毒特異性細胞毒性T淋巴細胞在異基因造血干細胞移植中的作用.pdf

1、第一部分：EBV特異性細胞毒性T淋巴細胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)及殺傷效果鑒定
　　目的：研究EB病毒特異性細胞毒性T淋巴細胞(EBV-CTL)體外誘導(dǎo)和擴增培養(yǎng)的方法，并檢測其殺傷的效果。方法：采集EBV血清抗體陽性的6例正常供體的外周血單個核細胞（PBMNC），用EBV轉(zhuǎn)化的B淋巴細胞系（BLCL）作為抗原遞呈細胞及抗原刺激劑,經(jīng)輻照滅活后不斷刺激培養(yǎng)自體PBMNC，誘導(dǎo)產(chǎn)生EBV-CTL，并將其擴增培養(yǎng)；采用流式細胞儀鑒定其免疫表型；然

2、后檢測不同效靶細胞比例條件下 EBV-CTL對自體 BLCL、自體植物血凝素培養(yǎng)的 B淋巴母細胞（PHA-Blast）、HLA不合供體的BLCL（alloBLCL）、K562細胞株的殺傷效果。結(jié)果：6例EBV血清抗體陽性正常供體來源的PBMNC在體外成功篩選并擴增培養(yǎng)了EBV-CTL，擴增效率為PBMNC數(shù)的18.6~55.0倍。刺激10次培養(yǎng)后的EBV-CTL對自體BLCL在20:1，10:1，5:1三種效靶細胞比例條件下特異性殺傷效

3、率的平均值分別為59.4%、43.2%、29.0%；對PHA-Blast、alloBLCL、K562的非特異性殺傷率在上述三種效靶細胞比例下平均值依次為7.1%、9.4%、10.3%（p﹤0.05），6.6%、8.3%、8.1%（p﹤0.05），5.4%、7.3%、6.3%（p﹤0.05）。結(jié)論：EBV-CTL能有效在體外篩選培養(yǎng)并擴增，并能有效殺傷HLA相合的BLCL；可望成為EBV相關(guān)性移植后淋巴細胞增殖性疾病的過繼免疫治療的有效方

4、法。
　　第二部分：異基因造血干細胞移植后淋巴細胞增殖性疾病的臨床分析
　　目的：提高對異基因造血干細胞移植后淋巴細胞增殖性疾?。≒TLD）的認識，探討其有效的治療策略。方法：回顧性分析2006年1月至2011年12月我院行異基因造血干細胞移植的524例病例，其中同胞全相合移植299例，無關(guān)供體相合移植149例，親緣半相合移植51例，臍血移植25例。結(jié)果根據(jù)臨床表現(xiàn)及病理結(jié)果共確診7例PTLD；在上述四種移植類型中PTLD發(fā)

5、病率依次為0.3%（1/299），2.7%（4/149），2.0%（1/51），4.0%（1/25）；后三者發(fā)病率均高于同胞全相合移植組（P=.044）；在預(yù)處理應(yīng)用抗胸腺細胞球蛋白（ATG）的患者中發(fā)病率為2.7%（6/225），明顯高于無ATG者（1/299, P=.046）。7例PTLD臨床表現(xiàn)特征主要分為兩類：6例發(fā)生在移植后2至8個月，播散性起病，正規(guī)經(jīng)驗性抗感染治療無效的發(fā)熱，淋巴結(jié)進行性腫大，血象三系進行性下降，EB病毒血