2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩95頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、研究目的:評價新型抗腫瘤化合物MONCPT對TOPOI的抑制活性、對腫瘤細胞增殖的抑制作用,以及對PC-3和A549裸小鼠移植瘤模型的試驗治療作用,并探索MONCPT誘導腫瘤細胞周期阻滯及抑制腫瘤新生血管生成作用的分子機制。
   研究方法:
   1.MONCPT的體外抗腫瘤活性研究包括:(1)TOPOI活性抑制試驗檢測MOCPT對TOPOI活性的影響;(2)MTT法測定MONCPT對9種腫瘤細胞株體外抑制作用,計算其

2、半數(shù)抑制濃度((IC50);(3)建立PC-3和A549裸小鼠移植瘤模型評價MONCPT的體內抗腫瘤活性。
   2.MONCPT通過周期阻滯抑制腫瘤生長的機制研究包括:(1)流式細胞術檢測MONCPT作用PC3細胞和A549的細胞后周期的變化;(2)Western-blotting法檢測細胞內周期相關蛋白的表達;(3)siRNA法沉默P53或P38基因的表達,MONCPT作用不同時間后流式細胞術檢測細胞周期的變化;(4)siR

3、NA法沉默P53或P38基因的表達,MONCPT作用不同時間后檢測細胞周期相關蛋白的表達。
   3.MONCPT抑制新生血管生成作用的研究:(1)MTT法測定MONCPT對內皮細胞EA.hy926細胞的抑制作用,計算IC50值;(2)AO/EB染色法檢測MONCPT作用后EA.hy926內皮細胞的凋亡情況;(3)流式細胞術檢測MONCPT作用后EA.hy926內皮細胞的凋亡情況;(4)雞胚絨毛尿囊膜法檢測MONCPT對新生血管

4、生成的影響;(5)HUVEC遷移實驗檢測MONCPT對新生血管生成的影響;(6)HUVEC血管腔形成實驗檢測MONCPT對新生血管生成的影響。
   研究結果:
   1.MONCPT具有廣譜有效的體內外抗腫瘤活性:(1)MONCPT可以顯著抑制TOPOI的活性,抑制DNA超螺旋的解旋;(2)MONCPT對9種腫瘤細胞表現(xiàn)出較強的體外抑制增殖作用,作用72h后計算半數(shù)抑制濃度IC50值為1.0×10-10 M-2.3×1

5、0-7M;(3)在A549裸小鼠移植瘤模型中,給藥15天后,MONCPT20mg/kg、MONCPT10mg/kg和MONCPT5mg/kg組腫瘤抑瘤率(%)分別為98.0、78.5和32.0,T/C(%)值分別為5.5、30.9和70。結果證實MONCPT在20mg/kg和10mg/kg劑量下都可以顯著抑制A549腫瘤的生長,具有很好的抗腫瘤活性。在PC-3裸小鼠移植瘤模型中給予MONCPT17天后,MONCPT20mg/kg、MON

6、CPT10mg/kg和MONCPT5mg/kg組T/C(%)值分別為16.7、37.7和71.3,抑瘤率(%)分別為77.7、51.8和29.6,結果證實,MONCPT在20mg/kg和10mg/kg劑量下都可以顯著抑制A549腫瘤的生長,具有很好的抗腫瘤活性。
   2.MONCPT通過調控周期相關蛋白的表達阻滯腫瘤細胞于G2-M期:(1)流式細胞術分析顯示MOCPT100nM可誘導A549細胞G2/M期阻滯,并具有時效依賴性

7、。MONCPT1000nM可誘導PC3細胞G0/G1期阻滯,而MONCPT10nM和100nM可誘導PC3細胞G2/M期阻滯;(2)MONCPT1000nM作用PC3細胞后發(fā)現(xiàn),CDK2,CDK4和cyclin D1蛋白表達下調,而MONCPT10nM和100nM作用PC3細胞后發(fā)現(xiàn),CDK7,CDK1和cyclin B1蛋白表達升高;(3)Westem-blot結果顯示,MONCPT可以通過上調p53蛋白,激活下游P21蛋白,從而下調

8、CDK1蛋白的表達,最終使A549細胞停滯在G2/M期;同時實驗結果表明MONCPT還可以通過下調CDK7、Cyclin H和Cdc25C蛋白表達,升高Weel蛋白表達以下調CDK1蛋白表達,最終導致A549細胞G2/M期阻滯。(4)MAPK和P13K/Akt信號通路在細胞周期調控中發(fā)揮重要的作用,結果表明MONCPT通過下調A549細胞中MAPK家族的p-ERK、JNK和p-AKT蛋白,上調p-P38和AKT蛋白參與G2/M期阻滯作用

9、的調控;
   3.MONCPT表現(xiàn)出很強的抑制新生血管生成的活性:(1)MONCPT對EA.hy926細胞作用72小時的IC50為0.13±0.04μM;(2)AO/EB染色發(fā)現(xiàn),隨著MONCPT給藥濃度的升高,EA.hy926細胞的凋亡率隨之升高;(3)流式細胞術結果表明,EA.hy926細胞的凋亡率與MONCPT存在濃度依賴性關系;(4)MONCPT對雞胚絨毛尿囊膜的新生血管形成具有明顯抑制作用;(5)MONCPT100n

10、M和200nM濃度可以顯著抑制HUVEC內皮細胞的遷移;(6)MONCPT50nM、100nM和200nM給藥濃度可以明顯減少HUVEC細胞形成的完整血管腔數(shù)目,并且呈現(xiàn)一定的濃度依賴性。
   結論:
   (1)MONCPT具有廣譜的體外抗腫瘤活性及高效的體內抗腫瘤生長活性;
   (2)MONCPT可能通過AKT、p53和MAPK通路阻滯腫瘤細胞于G2-M期;
   (3)MONCPT能顯著抑制新生

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論