重組人血管抑素對堿燒傷角膜新生血管作用的實驗研究.pdf

1、廣西醫(yī)科大學博士學位論文重組人血管抑素對堿燒傷角膜新生血管作用的實驗研究姓名：曾靜申請學位級別：博士專業(yè)：病理學及病理生理學指導(dǎo)教師：羅殿中20090601重組人血管抑素對堿燒傷角膜新生血管作用的實驗研究博十學位論文3、105只SD大鼠隨機取5只作正常對照(不作任何處理，取角膜作正常對照)，其余100只制作左眼堿燒傷CNV模型，隨機分為4組(每組25只)：實驗對照組、地塞米松組、K1組、K2組，分別點生理鹽水、01％地塞米松眼液和10u

2、∥ml、20u∥m1的K13滴眼液；于堿燒傷后1、3、7、14、21天每組隨機取5只大鼠，測量CNV長度，計算CNV面積，分析K13眼液對CNV的作用。隨后處死大鼠，取角膜備組織病理學檢查、電鏡檢查、免疫組化和ELISA檢測。。3、角膜切片HE染色，觀察角膜組織學變化，各組堿燒傷后不同時間炎癥細胞計數(shù)，比較各組角膜組織變化及炎癥細胞浸潤情況。4、電鏡觀察堿燒傷后K13治療組與對照組角膜超微結(jié)構(gòu)改變。5、制作大鼠白細胞耗竭模型，角膜堿燒傷

3、，觀察白細胞耗竭后角膜炎癥細胞浸潤及CNV生長情況，分析白細胞在堿燒傷角膜炎癥反應(yīng)及CNV形成中的作用及K13對堿燒傷角膜CNV及炎癥細胞浸潤的作用。6、免疫組化檢測4組堿燒傷后不同時間角膜VEGF表達，病理圖像分析儀測量平均光密度值(opticaldensity，OD)。CD34標記新生血管，檢測各組角膜新生血管密度(microvesseldensity，MVD)。分析K13對堿燒傷角膜VEGF表達及MVD的影響。7、ELISA檢測各

4、組角膜IL1Q表達，分析K13對堿燒傷角膜IL1Q表達的影響。結(jié)果1、成功建立堿燒傷CNV模型，大鼠角膜堿燒傷40s，為較理想的時間。2、堿燒傷后3天對照組出現(xiàn)CNV，堿燒傷后7天生長旺盛，14天達高峰，布滿角膜，21天略消退，但仍占據(jù)大部分角膜；K13治療組堿燒傷后3天未見明顯CNV，7天僅達堿燒傷斑邊緣，14天僅少量CNV長至瞳孔區(qū)，21天消退明顯。各時間點K13治療組CNV面積及MVD均較對照組減少(P005)，表明AS對堿燒傷C