煙草硝酸還原酶活性的近日節(jié)律性研究.pdf

1、目的：NO3-是旱地植物吸收氮素的主要形式，硝酸還原酶（NR）作為NO3-同化過(guò)程中的第一個(gè)關(guān)鍵酶，對(duì)作物的氮代謝等有著重要影響。硝酸還原酶活性(NRA)在氮代謝調(diào)節(jié)中存在著隨晝夜光暗條件改變而改變的規(guī)律。
　　方法：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用組織培養(yǎng)方法獲得基因型一致的煙草植株，用水培法培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料，分別在煙草的生根期、成苗期、伸根期、旺長(zhǎng)期、成熟期這五個(gè)主要生育期內(nèi)，在24h內(nèi)每間隔3h動(dòng)態(tài)測(cè)定煙草葉部NRA，NRA的測(cè)定采用活體法；NR基因

2、的相對(duì)表達(dá)量采用實(shí)時(shí)熒光定量（RT-PCR）技術(shù)檢測(cè)。
　　結(jié)果：（1）在一個(gè)晝夜周期內(nèi)，在煙草生長(zhǎng)發(fā)育的各主要生育期，其葉片NRA總體上表現(xiàn)出白天高于晚上的趨勢(shì)，即在恒定的光暗調(diào)節(jié)下NRA表現(xiàn)出自主節(jié)律性；（2）煙草各生育期葉部NRA的日變化存在差異，各生育期間NRA最大值表現(xiàn)的時(shí)期有所不同，但總體上表現(xiàn)為在18:00時(shí)NRA最高；（3）高、低兩種濃度供氮水平下測(cè)定煙草葉部NR基因的相對(duì)表達(dá)量及NRA，結(jié)果出現(xiàn)不一樣的規(guī)律，但均