牡荊油藥典標(biāo)準(zhǔn)修訂和基于光譜的STR基因分型專家系統(tǒng)研究.pdf

1、本文首先在《中國藥典》2005年版質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上對牡荊油的藥典標(biāo)準(zhǔn)進行了修訂；其次,基于光譜結(jié)合主判別變量(PDV)算法對短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)基因分型的專家系統(tǒng)進行了研究,以達到簡單、快速、低成本的檢測目的。
　　 對于牡荊油藥典標(biāo)準(zhǔn)的修訂,本文按照《中國藥典》2005年版的規(guī)定收集了不同產(chǎn)地、不同采收季節(jié)的牡荊葉并通過建立的相對標(biāo)準(zhǔn)的牡荊油提取方案對其進行了實驗審的牡荊油提取,同時也購買了不同生產(chǎn)廠家、不同批次的牡荊油樣品

2、作為研究對象。主要增加了牡荊油的薄層鑒別方法、重金屬限量檢查和GC含量測定方法。
　　 通過對薄層鑒別實驗中展開劑、顯色劑和點樣濃度的考察建立了牡荊油的薄層鑒別方法,之后通過相關(guān)的方法學(xué)考察和對所有批次的牡荊油樣品檢測表明,該法的專屬性較強,穩(wěn)定性及重現(xiàn)性均較好且操作簡單,可以作為牡荊油的鑒別方法。依據(jù)牡荊油的特點和相關(guān)揮發(fā)油重金屬限量檢測方法,選擇藥輿附錄中重金屬檢測方法的第二法對不同批次的牡荊油樣品進行測定,并確定了合格牡荊

3、油中重金屬的限量不超過百萬分之十。采用GC對不同批次的牡荊油樣品進行檢測并結(jié)合GC-MS研究確立了牡荊油含量測定的指標(biāo)成分,即:β-丁香烯。對不同來源牡荊油進行測定,并進行方法學(xué)和普通性研究,建立了β-丁香烯含量測定的藥典方法,獲得了不同來源牡荊油中β-丁香烯的含量分布范圍為25.44％～69.87％,同時建議合格牡荊油樣品中β-丁香烯龠量不少于20.0％的標(biāo)準(zhǔn)。該方法準(zhǔn)確度高、分析時間短、重現(xiàn)性及耐用性好,具有廣泛的適用性,可以作為藥

4、典中牡荊油的含量測定方法。
　　 對于基于光譜的TR基因分型專家系統(tǒng)研究,本文選擇法醫(yī)學(xué)常用的D16S539基因座作為研究對象。首先,基于近紅外光譜和主判別變量算法建立了總串?dāng)?shù)差異較小的兩個基因型的PDV模型,之后按照總核心重復(fù)序列數(shù)的差異建立了六個不同基因型的專家系統(tǒng),結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們均可以得到正確地判別,預(yù)測準(zhǔn)確率為100％。
　　 為了使STR的基因分型更具通用性,本文選擇使用紫外光譜(UVS)結(jié)合PDV的分型方法。以

5、基因型總串?dāng)?shù)相差為中等差異程度以及總串?dāng)?shù)完全相同的兩種情況進行了方法學(xué)研究,首先,選擇D16S539基因座的兩個總串?dāng)?shù)差異為4的基因型,結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們的基因型差異能夠用UVS對其正確判別,其判別率為100％:對于總串?dāng)?shù)完全相同的2個基因型,基于上述方法也能夠進行正確判別,由此證明此方法能夠適用于不同差異程度的基因型分型。最后,以該基因座的六個不同差異程度的基因型作為研究對象并基于它們的總核心重復(fù)序列數(shù)的差異來構(gòu)建其基因分型專家系統(tǒng),分型結(jié)