T輔助細(xì)胞因子IL-17、IFN-γ在中耳膽脂瘤中的表達(dá)及與骨質(zhì)破壞的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　 從蛋白質(zhì)和mRNA的水平闡明Th17、Th1的標(biāo)志細(xì)胞因子IL-17及IFN-γ在中耳膽脂瘤組織中的的表達(dá)特點，探討IL-17與IFN-γ之間的相互關(guān)系以及它們與中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞的相關(guān)性，希望進(jìn)一步完善中耳膽脂瘤骨質(zhì)破壞的發(fā)病機(jī)理，并為該病的防治提供新的思路。
　　 方法：
　　 1.實驗組標(biāo)本來自中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科醫(yī)院因慢性中耳炎行改良乳突根治術(shù)或鼓室成形術(shù)患者，其中膽脂瘤組的研究標(biāo)

2、本為膽脂瘤中耳炎的膽脂瘤上皮和上皮下基質(zhì)組織，非膽脂瘤組為非膽脂瘤型中耳炎的肉芽組織，術(shù)中觀察記錄患者的骨質(zhì)破壞程度；對照組為正常外耳道上皮組織，從同期行手術(shù)治療的慢性中耳炎患者隨機(jī)獲?。徽Ｖ卸衬そM織，從顳骨外傷骨折患者行面神經(jīng)減壓術(shù)中獲?。蝗繕?biāo)本均經(jīng)過術(shù)后常規(guī)病理活檢得到證實。所有受檢者實驗前2周內(nèi)均未全身或局部使用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑。
　　 2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)Envision二步法觀察IL-17和IFN-γ在20

3、例膽脂瘤組織、17例肉芽組織、13例正常外耳道皮膚和5例正常中耳粘膜中的表達(dá)特點。
　　 3.應(yīng)用ELISA法檢測IL-17和IFN-γ在27例膽脂瘤組織、23例肉芽組織、19例正常外耳道皮膚中的表達(dá)含量，比較它們在不同組織中表達(dá)的差異；分析IL-17和IFN-γ與骨質(zhì)破壞的相關(guān)性。
　　 4.應(yīng)用RT-PCR法檢測IL-17和IFN-γ mRNA在27例膽脂瘤組織、23例肉芽組織、19例正常外耳道皮膚和5例正常中耳粘膜

4、中的表達(dá)含量，比較它們在不同組織中表達(dá)的差異;分析IL-17和IFN-γ mRNA與骨質(zhì)破壞的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1.IL-17、IFN-γ蛋白免疫組化染色陽性結(jié)果為棕黃色顆粒，兩者主要定位于胞漿，多呈彌散性分布于膽脂瘤上皮下浸潤的炎性細(xì)胞；膽脂瘤上皮未見特異性表達(dá)。在肉芽組織中IL-17、IFN-γ陽性表達(dá)細(xì)胞為侵潤的炎性細(xì)胞。與肉芽組織、外耳道皮膚組和中耳粘膜組相比，IL-17、IFN-γ在膽脂瘤組織中的陽

5、性表達(dá)率明顯增加(p＜0.05)。
　　 2.經(jīng)ELISA檢測，膽脂瘤組、肉芽組織與外耳道皮膚組相比，IL-17、IFN-γ蛋白含量顯著增加(P＜0.001)。膽脂瘤組與肉芽組相比，IL-17的表達(dá)水平差異有顯著性(P=0.027)；IFN-γ在膽脂瘤組中的表達(dá)水平比肉芽組高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。在中耳膽脂瘤組織中IL-17(r=0.685，P＜0.001)、IFN-γ(r=0.498，P=0.008)與骨質(zhì)破壞

6、程度呈正相關(guān)，IL-17的蛋白含量與IFN-γ蛋白含量呈正相關(guān)(r=0.59，P=0.001)。肉芽組織中IL-17(r=0.138，P＞0.05)、IFN-γ(r=-0.029，P＞0.05)與骨質(zhì)破壞程度無相關(guān)。
　　 3.經(jīng)RT-PCR檢測，和肉芽組織、外耳道皮膚組及中耳粘膜組相比，IL-17、IFN-γmRNA在膽脂瘤組織的相對表達(dá)量明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；IL-17mRNA(r=0.655，P＜0.

7、001)、IFN-γ mRNA(r=0.603，P=0.001)與骨質(zhì)破壞程度呈正相關(guān)，IL-17mRNA含量與IFN-γ mRNA含量呈正相關(guān)(r=0.628，P＜0.05)。肉芽組織中IL-17、IFN-γ mRNA相對表達(dá)量比外耳道皮膚及正常中耳粘膜組織增高(P＜0.05)；IL-17mRNA(r=0.139，P＞0.05)、IFN-γ mRNA(r=0.108，P＞0.05)與骨質(zhì)破壞程度無相關(guān)。外耳道皮膚及與正常中耳粘膜組織相

8、比，兩個因子的mRNA相對表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.Th17、Th1的標(biāo)志性細(xì)胞因子IL-17、IFN-γ在中耳膽脂瘤組織中表達(dá)上調(diào)，且兩者成正相關(guān)，提示由Th17、Th1共同介導(dǎo)的免疫失調(diào)可能與中耳膽脂瘤的發(fā)病有關(guān)。
　　 2.IL-17、IFN-γ在中耳膽脂瘤中骨質(zhì)破壞成正相關(guān)，提示Th17、Th1及相關(guān)細(xì)胞因子IL-17、IFN-γ可能是膽脂瘤引起骨質(zhì)破壞的因素之一。