胞外信號調(diào)節(jié)激酶參與魚藤酮介導(dǎo)的大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞損傷.pdf

1、目的：探討胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular-signal regulated kinase，ERK1/2)在魚藤酮介導(dǎo)的多巴胺能細(xì)胞損傷中的信號調(diào)節(jié)機制。
　　 方法：魚藤酮處理體外培養(yǎng)的大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤（PC12）細(xì)胞株，建立帕金森病細(xì)胞模型。采用二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽（MTT）比色法檢測魚藤酮對PC12細(xì)胞活力的影響，免疫組織化學(xué)方法觀察魚藤酮對磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）表達的影響，免疫印跡法研

2、究p-ERK1/2蛋白表達的時間變化趨勢，并檢測ERK1/2上游激酶抑制劑PD98059對魚藤酮誘導(dǎo)ERK1/2磷酸化及細(xì)胞活力的影響。
　　 結(jié)果：PC12細(xì)胞隨魚藤酮（5 μmol/L）作用時間的增加，細(xì)胞吸光度（％）出現(xiàn)下降，1 h降至對照組的75.46±5.47,2 h、4 h、8 h分別降至70.42±1.94、65.23±0.96、59.04±2.85,24 h降至29.64±1.63，各時間點差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=

3、143.01，P=0.00<0.05）；與對照組（100.00±2.89）比較，q值分別為17.07、20.58、24.19、28.50、48.95，均P<0.01。鏡下觀察顯示魚藤酮處理的細(xì)胞中有明顯p-ERK1/2聚集；免疫印跡實驗結(jié)果顯示，隨魚藤酮作用時間的增加，p-ERK1/2出現(xiàn)雙相表達升高,30 min開始升高，1～2 h達高峰,4 h轉(zhuǎn)而降低,8 h又重新升高，16 h后基本消失；PD98059明顯抑制魚藤酮導(dǎo)致的ERK1