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1、目的:探討血清HBeAg表達(dá)和線粒體DNAD-Loop區(qū)突變的關(guān)系及其在肝細(xì)胞性肝癌發(fā)生中的作用。 方法:選取于2007年1至12月期間在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝膽外科行手術(shù)治療切除的40例肝細(xì)胞性肝癌患者的肝癌組織和癌旁組織,同期選取8例肝外傷患者的正常肝組織作對(duì)照。用聚合酶鏈反應(yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)結(jié)合直接測(cè)序方法檢測(cè)樣本組織線粒體DNAD-Loop區(qū)序列,同時(shí)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(Enz
2、ymeLinkedImmunosorbentAssay,ELISA)方法檢測(cè)肝癌患者血清HBeAg表達(dá)。 結(jié)果:使用DNAstar軟件將肝癌組織和癌旁組織以及正常肝組織線粒體DNAD-Loop區(qū)測(cè)序結(jié)果與線粒體DNA數(shù)據(jù)庫比對(duì)后得出: 1.共發(fā)現(xiàn)123個(gè)核苷酸位點(diǎn)發(fā)生堿基變異,核苷酸位點(diǎn)總變異率為11.0%(123/1122),提示線粒體DNAD-Loop區(qū)具有高度可變性。 2.發(fā)現(xiàn)2個(gè)新多態(tài)性位點(diǎn):NT228G
3、→C和NT16092T→A。 3.共發(fā)現(xiàn)34個(gè)核苷酸突變位點(diǎn),其中16個(gè)位點(diǎn)發(fā)生點(diǎn)突變,5個(gè)位點(diǎn)發(fā)生插入,13個(gè)位點(diǎn)發(fā)生缺失。在16個(gè)點(diǎn)突變中主要是T→C、G→A,占50.0%(8/16)。 4.肝癌組織線粒體DNAD-Loop區(qū)突變率為40.0%(16/40),癌旁組織線粒體DNAD-Loop區(qū)突變率為10.0%(4/40),正常肝組織線粒體DNAD-Loop區(qū)突變率為0.0%(0/8),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05
4、)。 5.40例肝細(xì)胞性肝癌患者中HBeAg陽性21例,占52.6%(21/40),HBeAg陽性同時(shí)線粒體DNAD-Loop區(qū)突變12例,HBeAg陽性的肝癌組織線粒體DNAD-Loop區(qū)突變率高(p<0.05)。 結(jié)論 1.線粒體DNAD-Loop區(qū)是一個(gè)具有高度多態(tài)性和突變性的區(qū)域,在肝細(xì)胞性肝癌組織中突變率較高。 2.肝細(xì)胞性肝癌癌旁組織線粒體DNAD-Loop區(qū)突變率達(dá)10.0%,提示肝癌癌旁組
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