金銀花內(nèi)生真菌的分離鑒定和分子系統(tǒng)學(xué)研究.pdf

1、目的:對金銀花內(nèi)生真菌進(jìn)行了分離鑒定和分子系統(tǒng)學(xué)分析,為金銀花內(nèi)生真菌的種屬鑒別和資源的開發(fā)利用提供科學(xué)的依據(jù),并為下一步深入研究金銀花內(nèi)生真菌的藥用價值提供理論基礎(chǔ)。方法:1采用組織塊法對金銀花內(nèi)生真菌進(jìn)行分離并純化。2采用形態(tài)學(xué)方法對內(nèi)生真菌進(jìn)行初步鑒定。3利用分子生物學(xué)方法對分離出的四株菌種進(jìn)行ITS序列測定,應(yīng)用GenBank中Blast程序進(jìn)行相似性分析。4應(yīng)用聚類分析軟件clustalx進(jìn)行序列分析并且計算進(jìn)化距離,構(gòu)建系統(tǒng)

2、發(fā)育樹。結(jié)果:1通過分離純化得到了四株純菌種,編號分別為JYH1、JYH2、JYH3、JYH4,并進(jìn)行了初步鑒定。2得到了四株菌種的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS序列,通過對比并依據(jù)形態(tài)學(xué),鑒定出JYH1與黃綠木霉同源性達(dá)到了99％,可斷定為木霉屬、JYH2與馬爾尼菲青霉菌同源性達(dá)到了99%,可斷定為青霉屬、JYH3與茶藨子葉狀層菌同源性達(dá)到97%,可以斷定為葉狀層菌屬、JYH4交枝頂孢霉同源性達(dá)到了99%,可斷定為枝頂孢霉屬。3從GenBank中