依托咪酯對大鼠S1區(qū)和VPM核神經元興奮性突觸后電流的影響.pdf

1、背景與目的:
　　 全麻藥物導致意識消失的機制逐漸成為近年來國內外的研究熱點。相關研究認為皮層—丘腦與意識形成密切相關，意識消失可能是該區(qū)域內神經元谷氨酸介導的興奮性突觸傳遞減弱和抑制性受體介導的抑制性突觸傳遞增強的結果。其中，谷氨酸遞質和受體的功能變化可能與全麻意識消失效應有關。而感覺為意識的組成成分之一，其可通過感覺投射通路中的桶狀皮層(Barrel cortex，S1)和丘腦腹后內側核(Ventralposteromedi

2、al nucleus，VPM)神經元，以興奮性神經遞質—谷氨酸為遞質進行傳導。目前關于臨床常用靜脈全麻藥物依托咪酯對興奮性突觸傳遞和谷氨酸受體影響的研究報道存在差異性，且尚未見關于依托咪酯對感覺投射通路S1區(qū)和VPM核神經元興奮性突觸傳遞影響的研究報道。故本實驗將以前期研究為基礎，通過觀察依托咪酯對皮層S1區(qū)和丘腦VPM核神經元自發(fā)興奮性突觸后電流(sEPSC)與微小興奮性突觸后電流(mEPSC)的影響，探討依托咪酯影響中樞整合軀體感覺

3、信息的具體方式，進一步推測依托咪酯引起意識消失的相關機制。
　　 方法:
　　 使用11-19天的SD大鼠、采用腦片全細胞記錄膜片鉗技術，在-67mV鉗制電壓下，分別記錄腦片S1區(qū)(n=6)或VPM核(n=6)的單個神經元在灌注3、6、12μmol/L（μM）依托咪酯前后5min內sEPSC和mEPSC電流的變化。在記錄過程中，持續(xù)灌流含有GABAA受體阻斷劑荷包牡丹堿的人工腦脊液，以消除依托咪酯對GABAA受體的直接激

4、動作用而間接影響興奮性突觸傳遞。記錄sEPSC時不加入河豚毒素(TTX)，記錄mEPSC時在人工腦脊液中加入TTX阻斷快鈉通道以阻斷動作電位。
　　 結果:
　　 ①依托咪酯(3μM)對S1區(qū)sEPSC的頻率、振幅、Decay time沒有影響(P＞0.05);而依托咪酯（6μM、12μM）對S1區(qū)sEPSC的頻率有影響，且抑制率分別為37％±13％和40％±11％(P＜0.01)，但對振幅、Decay time沒有影響

5、（P＞0.05）;提示依托咪酯對腦片皮層神經元的自發(fā)興奮性突觸傳遞沒有影響，6μM和12μM則呈濃度依賴性的抑制動作電位參與的突觸前膜谷氨酸遞質的釋放。
　　 ②依托咪酯(12μM)能抑制S1區(qū)mEPSC的頻率、振幅，抑制率分別為37％±13％、10％±5％（P＜0.01），但對mEPSC的Decay time沒有作用(P＞0.05);依托咪酯（3μM、6μM）對mEPSC的頻率、振幅、Decay time沒有影響(P＞0.05

6、)。提示本實驗設置濃度的依托咪酯不影響突觸后膜谷氨酸受體的敏感性，12μM依托咪酯能抑制突觸前膜終端自發(fā)的釋放興奮性神經遞質并抑制其引起的突觸后效應，3μM和6μM對其沒有影響。
　　 ③3μM、6μM和12μM依托咪酯對VPM核sEPSC和mEPSC的頻率、振幅、Decaytime沒有影響(P＞0.05)。提示本實驗設置濃度的依托咪酯不影響VPM核神經元的興奮性突觸傳遞。
　　 結論:
　　 ①依托咪酯可通過突