甜菜夜蛾抗蟲(chóng)酰肼品系選育及其抗性發(fā)展監(jiān)測(cè)研究.pdf

1、甜菜夜蛾抗蟲(chóng)酰肼品系選育及其抗性發(fā)展監(jiān)測(cè)研究結(jié)果如下： 1．采用群體汰選與單對(duì)汰選相結(jié)合的方法對(duì)甜菜夜蛾進(jìn)行了12代室內(nèi)汰選，其抗性倍數(shù)只有敏感品系的5．24倍，抗性發(fā)展緩慢；群體汰選中穿插幾代單對(duì)汰選可以加速抗性品系的選育。 2．蟲(chóng)酰肼對(duì)甜菜夜蛾蛹期影響明顯，汰選品系（如F1為4．50％）化蛹率明顯低于敏感品系（93．33％）。當(dāng)飼毒濃度相同時(shí)，化蛹率有恢復(fù)的趨勢(shì)，如F6、F7、F8三代飼毒濃度都為0．67 mg/kg

2、，化蛹率分別為3．70％、9．08％、11．20％。隨著汰選世代增加，畸蛹率先是緩慢增加，到F7代時(shí)達(dá)到最大33．81％， F8代開(kāi)始下降，但均比敏感品系高。汰選品系雌雄蛹重均下降，提高飼毒濃度時(shí)下降程度加大，如飼毒濃度由F8代0．67mg/kg增加到F9代0．80 mg/kg，雌蛹重由89．43 mg下降到75．19 mg。雌雄蛹性比變化很小，雌蛹比率在46．24～59．51％之間。說(shuō)明對(duì)敏感品系施加選擇壓影響汰選品系的生長(zhǎng)發(fā)育，但對(duì)

3、種群性比影響較小。 雌雄成蟲(chóng)羽化率都低于敏感品系，F(xiàn)5代最低，分別比敏感品系低79．38％、71．07％，后又緩慢恢復(fù)。汰選品系雌雄成蟲(chóng)畸蛾率比敏感品系高，分別是敏感品系的1．43～3．17倍、1．11～3．13倍。說(shuō)明蟲(chóng)酰肼對(duì)甜菜夜蛾成蟲(chóng)羽化有一定抑制作用。 汰選品系雌雄成蟲(chóng)LT50分別比敏感品系縮短了1．59d、2．17d；單雌產(chǎn)卵量顯著低于敏感品系，F(xiàn)10代最低，僅為敏感品系的0．30倍；孵化率變化較小，但仍比敏感

4、品系低， F10、F11代與敏感品系差異極顯著，分別相當(dāng)于敏感品系的56．03％和55．53％。說(shuō)明蟲(chóng)酰肼對(duì)甜菜夜蛾成蟲(chóng)的影響不僅表現(xiàn)在成蟲(chóng)壽命的縮短，而且表現(xiàn)在單雌產(chǎn)卵量、孵化率的下降。 3．汰選品系無(wú)毒飼養(yǎng)子代與汰選品系當(dāng)代相比，化蛹率、畸蛹率、平均蛹重、羽化率、畸蛾率、成蟲(chóng)死亡中時(shí)、單雌產(chǎn)卵量及孵化率均有不同程度的恢復(fù)，如F6（3）、F6（6）代單雌產(chǎn)卵量比F6代分別增加到了180．67、229．00粒/♀；化蛹率F7（1

5、）、F7（2）、F7（3）代比F7代分別增加到了61．12％、58．52％、65．85％，但仍未恢復(fù)到敏感品系的水平。表明蟲(chóng)酰肼是一種緩效且持效性較強(qiáng)的殺蟲(chóng)劑，其對(duì)子代的后續(xù)效應(yīng)至少可以影響3代，汰選品系要恢復(fù)到敏感品系可能需要多個(gè)世代的積累。 4．飼毒法室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，對(duì)蟲(chóng)酰肼產(chǎn)生抗藥性的甜菜夜蛾對(duì)甲氧蟲(chóng)酰肼、氟啶脲、溴蟲(chóng)腈和毒死蜱抗性倍數(shù)分別為1．00、0．89、0．82和0．94，無(wú)明顯交互抗性；與滅多威、高效氯氰菊

6、酯和多殺菌素抗性倍數(shù)分別為1．45、1．78和2．52倍，有一定程度的交互抗性。 5．蟲(chóng)酰肼處理甜菜夜蛾敏感品系和第九代汰選品系同一天所產(chǎn)卵塊，其孵化抑制中濃度分別為179．38、160．71 mg/kg，幼蟲(chóng)存活抑制中濃度分別為18．64、30．53mg/kg，說(shuō)明蟲(chóng)酰肼對(duì)甜菜夜蛾敏感品系、汰選品系卵孵化率及孵化后幼蟲(chóng)存活率均有抑制作用，但對(duì)孵化的抑制作用是敏感品系小于汰選品系，對(duì)孵化后幼蟲(chóng)存活的影響則是前者大于后者。

7、 蟲(chóng)酰肼處理甜菜夜蛾敏感品系和第八代汰選品系初孵幼蟲(chóng)，幼蟲(chóng)存活率和化蛹率隨處理濃度的增加而降低，幼蟲(chóng)歷期延長(zhǎng)，與0．08 mg/kg相比，0．40mg/kg幼蟲(chóng)存活率分別為0．04、0．24倍，化蛹率分別為0．05、0．21倍，幼蟲(chóng)歷期分別延長(zhǎng)了2．71、6．19d。同一濃度下，汰選品系幼蟲(chóng)存活率和化蛹率均高于敏感品系，幼蟲(chóng)存活率分別是敏感品系的1．54—10．01倍，化蛹率分別是1．70—8．01倍，幼蟲(chóng)歷期比敏感品系縮短0．94～2

8、．59d，表明汰選品系受影響小于敏感品系。 蟲(chóng)酰肼處理甜菜夜蛾敏感品系和第十一代汰選品系3齡幼蟲(chóng)，與0．20 mg/kg相比，0．125mg/kg幼蟲(chóng)化蛹率分別為6．00、4．60倍，說(shuō)明化蛹率隨蟲(chóng)酰肼濃度的增加而降低。雌雄蛹重均有遞減的趨勢(shì)，兩品系同一濃度下差異不大。雌蛹比例隨濃度增加變化較小，敏感品系雌蛹比例≤50．00％，汰選品系雌蛹比例≥50．00％。羽化率除在2．00 mg/kg濃度時(shí)影響較大外，其它處理濃度下影響較小

9、。 種群適合度研究表明，汰選品系相對(duì)敏感品系存在生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖不利性，相對(duì)適合度為0．31。 6．采用分光光度法測(cè)定解毒酶比活力，結(jié)果表明汰選品系及其分時(shí)處理、自然品系CarE比活力分別是敏感品系的1．20、1．34、1．94、1．80、2．67倍，差異極顯著；GST比活力分別是敏感品系的2．34、5．11、5．62、3．76、0．96倍，差異極顯著，說(shuō)明蟲(chóng)酰肼具有誘導(dǎo)CarE和GST活性增強(qiáng)的作用，甜菜夜蛾對(duì)蟲(chóng)酰肼抗藥

10、性的形成可能與此有關(guān)。 CarE酶動(dòng)力學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，汰選品系Km值是敏感品系的0．83倍，差異顯著，即汰選品系具有更大的底物親和力，這可能是導(dǎo)致汰選品系CarE活性增強(qiáng)的原因。自然品系Km值、Vmax值分別是敏感品系的2．33倍和4．97倍，與敏感品系、汰選品系間均存在極顯著的差異，說(shuō)明自然品系不僅酶分子結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的變化，而且酶量的表達(dá)也明顯的增加。酯酶同工酶電泳酶譜在遷移率、譜帶數(shù)目、酶帶染色深淺等方面均存在明顯差異，分析

11、結(jié)果與CarE活力測(cè)定、酶動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果相符。 7．采用分光光度法測(cè)定靶標(biāo)酶AchE比活力，結(jié)果表明汰選品系及其分時(shí)處理、自然品系A(chǔ)chE比活力與敏感品系相比，比值在1．09～2．33之間，差異極顯著，表明AchE對(duì)蟲(chóng)酰肼敏感，甜菜夜蛾對(duì)蟲(chóng)酰肼產(chǎn)生抗藥性與AchE無(wú)關(guān)。 8．采用分光光度法測(cè)定保護(hù)酶比活力，與敏感品系相比，汰選品系CAT、POD、SOD比活力分別達(dá)到了0．94、0．82、3．72倍，自然品系CAT、POD

12、、SOD比活力分別達(dá)到了2．79、4．33、7．40倍，汰選品系3個(gè)分時(shí)處理CAT、POD、SOD比活力分別是敏感品系的1．43、1．52、4．75倍，1．42、1．44、3．54倍，2．19、3．39、6．54倍，比活力均有不同程度上升，且3個(gè)分時(shí)處理比活力均是先上升，接著稍下降，后又快速上升，其變化規(guī)律基本一致，其中SOD比活力的變化較CAT、POD明顯，由此可以推斷甜菜夜蛾對(duì)蟲(chóng)酰肼抗藥性的增強(qiáng)可能與其體內(nèi)保護(hù)酶系中SOD有關(guān)，而與

13、CAT、POD有一定關(guān)系。 9．采用分光光度法測(cè)定表皮酚氧化酶PO和幾丁質(zhì)酶比活力，結(jié)果表明甜菜夜蛾蟲(chóng)酰肼汰選品系這兩種酶比活力比敏感品系分別上升37．64％和27．37％，自然品系兩酶比活力分別上升59．63％和60．29％，說(shuō)明這兩種酶可能參與了蟲(chóng)酰肼抗藥性的產(chǎn)生。PO動(dòng)力學(xué)研究表明，汰選品系Km、Vmax分別是敏感品系的2．53、2．52倍，差異極顯著，說(shuō)明PO與底物的親和力下降，但酶量的表達(dá)增加，PO活性的增強(qiáng)是酶量的過(guò)